研究背景和目的系统性红斑狼疮(SLE)是一种常见的自身免疫性疾病,以自身抗体生成和多器官、多系统损害为特征。随着诊断和治疗技术的不断进步SLE患者的预后得到显著改善,但血管疾病包括冠心病、中风及外周血管疾病成为影响SLE患者预后的重要因素,心血管事件是仅次于感染排在第二位的导致SLE死亡的原因。胰岛素抵抗(IR)是贯穿于多种代谢相关性疾病的主线,是促使糖尿病、高血压、高脂血症等多种代谢相关疾病发生发展的重要病理生理基础。SLE患者合并IR的情况目前国内尚未见到较大规模较为系统的研究报告。脂联素是一种由脂肪细胞分泌的多功能蛋白,在代谢相关疾病和IR的病生理过程中起着重要的作用,是近年来的研究热点。然而,脂联素与SLE的关系、它是否参与SLE患者IR的发生和发展目前尚不明确。激素需要通过其特异的受体介导才能发挥作用。脂联素作为一种脂肪细胞因子具有维持能量代谢内稳态、调节免疫平衡、调控细胞增殖等重要作用,因此,脂联素受体(AdipoR)被认为是具有潜在应用价值的新靶点。然而,以往对AdipoR的研究都集中在其在组织器官上的表达,而AdipoR在外周血细胞上的表达情况鲜为人知。Pang等开创性地使用流式细胞技术检测到健康人外周血单个核细胞上的AdipoR1/2表达,首次证实在人类外周血单个核细胞上同样存在两种受体的表达。这一发现提示脂联素具有更为广泛的免疫、炎症调节作用,可能是将代谢紊乱、IR、炎症和免疫联系在一起的“桥”因子。通过对AdipoR在外周血细胞上表达的深入研究,可以进一步从分子水平解析脂联素在不同疾病中的作用,将有助于揭示脂联素在SLE等自身免疫性疾病和其他炎症反应中的作用机制。方法1.以天津医科大学总医院感染免疫科住院确诊的SLE患者120例和年龄、性别相匹配的41例我院体检中心的健康体检者为研究对象,采集身高、体重、腰围、臀围、血压等临床资料,并测定空腹血脂、血糖及胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、Homa-β细胞功能指数(HBCI)和胰岛素敏感指数(ISI),进行两组间比较。SLE患者依据SLEDAI评分将其分为缓解组73例、活动组47例；按年龄分为≥35岁组48例和<35岁组72例；依据亚太地区肥胖诊断标准将患者分为BMI≥25kg/m2肥胖组93例和BMI25kg/m2的非肥胖组27例；以FINS=15mIu/L为切点,将其分为FINS升高组(FINS≥15mIu/L)39例和FINS正常组(FINS<15mIu/L)81例；以HOMA-IR=2.2为切点将其分为HOMA-IR≥2.2组51例和HOMA-IR<2.2组69例；依据SLE患者近3个月糖皮质激素(以下简称为激素)使用剂量将其分为未使用激素组32例、激素<7.5mg/d组18例和激素≥7.5mg/d组70例,分别进行组间比较。采用直线相关分析和多元回归分析探讨SLE患者HOMA-IR的相关影响因素。2.在第一部分的研究基础上筛选SLE患者60例为病例组,年龄、性别相匹配的25例健康体检者为对照组,采用酶联免疫吸附方法(ELISA法)检测血清脂联素水平,比较两组间的临床、生化指标和血清脂联素水平。按照第一部分中的SLE患者分组方法分别比较活动组与缓解组、年龄≥35岁组与<35岁组、肥胖组和非肥胖组、FINS升高组和FINS正常组、HOMA-IR≥2.2组和HOMA—IR<2.2组间的临床、生化指标和血清脂联素水平。采用直线相关分析和多元回归分析探讨SLE患者血清脂联素水平的相关影响因素。3.采用流式细胞技术检测15例SLE患者和20例健康体检者外周血CD14+单核细胞、CD3+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞和CD56+NK细胞表面AdipoRl和AdipoR2表达。分别比较病例组和对照组外周血上述4种单个核细胞上的AdipoRl和AdipoR2表达水平。并将SLE患者分为活动组和缓解组、激素治疗组和非激素治疗组、HOMA-IR≥2.2组和HOMA-IR<2.2组分别比较各组间外周血单个核细胞上的AdipoRl和AdipoR2表达水平,探讨SLE疾病活动、激素治疗和合并IR对Adipo R1/R2表达的影响。结果1.SLE组的WHR、BF%、TG(?)高于正常对照组,HDL低于正常对照组。提示SLE组患者出现体脂含量升高和腹型肥胖,且存在脂代谢异常。SLE组的FINS、HOMA-IR和HOMA—HBCI均高于对照组,ISI较对照组减低,提示SLE组存在IR。分组比较结果显示SLE≥35岁组的BMI、BF%、舒张压和HDL高于<35岁组,提示体质量超重、体脂含量升高、高血压及高脂血症更多见于年龄较大的患者。与非肥胖组相比肥胖组患者的FINS和HOMA-IR明显增高,ISI明显减低,提示肥胖患者的IR倾向更加明显。活动组和缓解组SLE患者的WHR、BF%、CRP、TG和HOMA-IR分别高于正常对照组,FBG和FINS水平活动组患者高于正常对照组,而缓解组与正常对照之间无差异。SLE患者未使用激素组、激素<7.5mg/d组和激素≥7.5mg/d组三组的FINS、HOMA-IR和HOMA—HBCI组间差异无统计学意义,高FINS血症组的患者HOMA-IR较高,而ISI较低,提示SLE合并高FINS血症患者胰岛素敏感性减低,具有更为显著的IR倾向。SLE患者HOMA-IR≥2.2组的BMI、WHR、FBG和FINS显著高于HOMA-IR<2.2组,相反地ISI显著低于HOMA-IR<2.2组。提示IR更多见于体重升高和腹型肥胖的患者；且这部分患者的FBG和FINS也相应升高。相关性分析显示HOMA-IR与BMI、CRP、FBC、FINS和HOMA-HBCI正相关,与TG、ISI呈负相关。多元回归分析结果显示SLE患者FINS的独立影响因素为：BMI、CRP、TG、HOMA-IR和ISI; HOMA-IR的独立影响因素为：BMI、ISI、FINS和FBG。2.SLE组血清脂联素水平高于正常对照组。分组比较SLE活动组与缓解组、年龄≥35岁组与<35岁组之间的脂联素水平无差异,肥胖组脂联素水平低于非肥胖组,FINS升高组脂联素水平低于FINS正常组,HOMA—IR≥2.2组脂联素水平低于HOMA—IR＜2.2组。SLE患者未使用激素组、激素<7.5mg/d组和激素≥7.5mg/d组三组的血清脂联素水平组间差异无统计学意义。相关性分析结果显示SLE组血清脂联素水平与CRP和ISI呈正相关,与BF%、WHR、FBG、FINS、和HOMA—IR呈负相关,与年龄、血压、BMI、血脂、病程、疾病活动指标(SLEDIA、IgG、C3和ds—DNA)等未见直线相关关系。多元回归分析结果提示ISI、HOMA—IR和CRP是SLE患者血清脂联素水平的独立影响因素。3.在SLE患者和健康者的外周血CD14+单核细胞、CD3+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞和CD56+NK细胞表面均检测到AdipoR1和AdipoR2表达。其中SLE患者CD3+细胞表而Adipo R1/R2表达水平低于正常对照组,CD 19+和CD56+细胞表而Adipo R1/R2表达水平高于正常对照组,CD14+细胞表而Adipo R1/R2表达水平两组间差异无统计学意义。相关性分析发现仅正常对照组的CD56+细胞表面的AdipoR1表达水平与血清脂联素水平呈正相关关系,CD14+和CD19+细胞表面的AdipoR2表达水平与血清脂联素水平呈正相关关系,两组的其它单个核细胞表面的AdipoR1/R2表达水平与血清脂联素水平无相关关系。而以SLE组和正常对照组为整体进行相关性分析,显示除CD3+细胞表面的AdipoR1/R2表达水平与血清脂联素水平无相关关系外,其它CD14+、CD19+和CD56+细胞表面的AdipoR1/R2水平均与血清脂联素水平呈正相关关系。而且CD14+、CD3+、CD19+和CD56+细胞表面的AdipoR1与AdipoR2表达水平均呈正相关关系。结论1.SLE患者体内存在脂代谢异常和IR。体脂含量升高和腹型肥胖是患者胰岛素敏感性减低和IR的重要原因。除经典的IR相关危险因素外,SLE患者本身的持续炎症反应和治疗过程同样参与IR形成机制。特别是糖皮质激素,目前仍为SLE治疗的基础用药,也是SLE患者IR形成中重要的影响因素,应强调合理应用,尽可能减少用药剂量。2.SLE患者血清脂联素水平升高,且不受病程、疾病活动度和糖皮质激素治疗的影响,但与HOMA-IR和FINS呈负相关关系,与ISI呈正相关关系,提示脂联素并非通过增加胰岛素的分泌而是改善胰岛素敏感性完成其保护作用。SLE患者血清脂联素水平与HOMA-IR显著负相关,合并IR的SLE患者的血清脂联素水平显著低于无IR的SLE患者,且HOMA-IR是血清脂联素水平的独立危险因素。SLE患者体内高脂联素水平与脂联素效应减弱并存,提示可能存在脂联素抵抗。3.在人类外周血CD14+单核细胞、CD3+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞和CD56+NK细胞表面均有AdipoR1和AdipoR2表达,提示脂联素具有更为广泛的免疫调节作用,它可能是将代谢紊乱、IR、炎症和免疫联系在一起的“桥”因子。人类外周血PBMCs上的AdipoR1和AdipoR2的表达水平呈正相关,且与血清脂联素水平正相关。SLE患者外周血B淋巴细胞和NK细胞表面AdipoR1/R2均高于正常对照组,可能与患者体内持续的炎症反应有关。
