两种芋兰属植物LS功能及其调控的初步研究
毛唇芋兰论文 广布芋兰论文 分枝相关基因LS论文 遗传转化论文
论文详情
摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
引言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-20页 |
1 植物分枝发育的研究进展 | 第14-18页 |
1.1 植物分枝的形成及种类 | 第14-15页 |
1.2 影响分枝发育的因素 | 第15-16页 |
1.3 植物分枝发育的分子调控机制 | 第16-17页 |
1.4 植物分枝相关基因LS研究进展 | 第17-18页 |
2 GRAS转录因子家族简介 | 第18-20页 |
2.1 GRAS蛋白的结构特征 | 第18-19页 |
2.2 GRAS蛋白的生物学功能 | 第19-20页 |
第二章 LS蛋白的亚细胞定位 | 第20-27页 |
1 实验材料 | 第20-21页 |
1.1 植物材料 | 第20页 |
1.2 菌株和载体 | 第20页 |
1.3 试剂 | 第20-21页 |
1.4 仪器设备 | 第21页 |
2 实验方法 | 第21-23页 |
2.1 两种LS蛋白的亚细胞定位预测 | 第21-22页 |
2.2 表达基因在烟草叶片中的瞬时表达 | 第22页 |
2.3 原生质体中瞬时表达基因的亚细胞定位 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-25页 |
3.1 两种LS蛋白的亚细胞定位预测分析 | 第23-24页 |
3.2 烟草叶片中表达基因的亚细胞定位 | 第24页 |
3.3 原生质体中瞬时表达基因的亚细胞定位 | 第24-25页 |
4 小结与讨论 | 第25-27页 |
第三章 转录激活活性与DNA结合功能分析 | 第27-43页 |
1 实验材料 | 第27-28页 |
1.1 菌株与质粒 | 第27页 |
1.2 酶和试剂 | 第27-28页 |
1.3 试剂盒 | 第28页 |
1.4 仪器设备 | 第28页 |
2 实验方法 | 第28-36页 |
2.1 拟南芥LAS基因克隆 | 第28-30页 |
2.2 转录激活活性与DNA结合活性分析 | 第30-36页 |
3 结果与分析 | 第36-42页 |
3.1 拟南芥LAS基因的克隆 | 第36-37页 |
3.2 pGBKT7、pGADT7、pHIS2质粒的提取 | 第37页 |
3.3 NaLS、NfLS和LAS的扩增 | 第37-38页 |
3.4 重组产物的鉴定 | 第38-39页 |
3.5 α-半乳糖苷酶活性分析 | 第39-40页 |
3.6 转录因子与DNA结合功能分析 | 第40-42页 |
4 小结与讨论 | 第42-43页 |
第四章 农杆菌介导烟草的遗传转化 | 第43-53页 |
1 实验材料 | 第43-44页 |
1.1 植物材料 | 第43页 |
1.2 菌株和载体 | 第43页 |
1.3 试剂 | 第43-44页 |
1.4 仪器设备 | 第44页 |
2 实验方法 | 第44-48页 |
2.1 烟草无菌苗的种植 | 第44页 |
2.2 叶盘法转化烟草 | 第44-46页 |
2.3 转LS基因烟草植株PCR验证 | 第46页 |
2.4 qRT-PCR分析各植株LS基因表达 | 第46-48页 |
2.5 表型分析 | 第48页 |
3 结果与分析 | 第48-52页 |
3.1 菌液PCR结果 | 第48-49页 |
3.2 转LS基因烟草植株PCR验证 | 第49-50页 |
3.3 转基因烟草的表达量分析 | 第50-51页 |
3.4 转基因烟草表型分析 | 第51-52页 |
4 小结与讨论 | 第52-53页 |
第五章 拟南芥的遗传转化 | 第53-64页 |
1 实验材料 | 第53页 |
1.1 植物材料 | 第53页 |
1.2 菌株和载体 | 第53页 |
1.3 试剂 | 第53页 |
1.4 仪器设备 | 第53页 |
2 实验方法 | 第53-56页 |
2.1 花序浸染法转化拟南芥 | 第53-54页 |
2.2 拟南芥转化植株种子的筛选 | 第54-55页 |
2.3 转基因植株的获得及PCR检测 | 第55页 |
2.4 组织表达特异性分析 | 第55-56页 |
2.5 表型分析 | 第56页 |
3 结果与分析 | 第56-62页 |
3.1 拟南芥种子的筛选 | 第56-57页 |
3.2 PCR检测鉴定结果 | 第57页 |
3.3 组织表达特异性分析 | 第57-59页 |
3.4 表型分析 | 第59-62页 |
4 小结与讨论 | 第62-64页 |
第六章 结论与讨论 | 第64-66页 |
1 结论 | 第64页 |
1.1 毛唇芋兰NfLS与广布芋兰NaLS均定位于细胞核中 | 第64页 |
1.2 毛唇芋兰NfLS与广布芋兰NaLS两种蛋白在酵母中不具转录激活活性和DNA结合活性 | 第64页 |
1.3 成功获得转两种芋兰LS基因的再生烟草 | 第64页 |
1.4 成功获得转两种芋兰LS基因的过表达拟南芥 | 第64页 |
2 讨论 | 第64-66页 |
2.1 转基因烟草及拟南芥纯合子的获取及功能分析 | 第64-65页 |
2.2 LS基因酵母双杂交文库的构建 | 第65页 |
2.3 LS启动子相关研究 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录 | 第72-86页 |
附录1 :NfLS和NaLS的基因组序列和氨基酸序列对比图 | 第72-73页 |
附录2 :Star Pure柱式超纯质粒大提试剂盒操作步骤 | 第73-74页 |
附录3 :Genstar植物基因组DNA提取试剂盒(普通型)操作步骤 | 第74页 |
附录4 :天根多功能DNA回收试剂盒 | 第74-75页 |
附录5 :TIAN prep Mini Plasmid Kit操作步骤 | 第75-76页 |
附录6 :Gene Mark植物总RNA提取试剂盒操作步骤 | 第76-77页 |
附录7 :植物表达载体pRI101AN-DNA图谱 | 第77-78页 |
附录8 :pLB零背景克隆试剂盒 | 第78-80页 |
附录9 :Clon ExpressⅡOne Step Cloning kit说明书 | 第80-83页 |
附录10 :图目录 | 第83-84页 |
附录11 :表目录 | 第84-85页 |
附录12 :缩略词表一览 | 第85-86页 |
在校期间发表论文情况 | 第86-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
附件 | 第88页 |
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