地塞米松对顺铂引起的人肺腺癌细胞SPC-A1凋亡的抑制作用及其分子机制的初步探讨

目的:研究地塞米松(DEX)对顺铂(CDDP)引起的人肺腺癌细胞SPC-A1凋亡的抑制作用及探讨其初步的分子机制。方法:采用人肺腺癌细胞SPC-A1,分别加入不同浓度的DEX体外诱导培养,24小时后加入不同浓度的CDDP继续培养48小时,用MTT法检测细胞的存活率:再用1μmol/LDEX刺激SPC-A1细胞,分别于1hr、2hr、4hr、6hr、12hr提取细胞的总RNA;采用半定量RT-PCR技术,检测SPC-A1细胞中的血清/糖皮质激素-诱导激酶(SGK-1)和有丝分裂原蛋白激酶(MKP-1)的表达;同时用生物素标记的抗糖皮质激素受体(GR)抗体对SPC-A1细胞行免疫组化染色来检测GR的表达。结果:SPC-A1细胞经DEX诱导后,对CDDP所致的凋亡有抵抗作用并与DEX浓度呈剂量依赖关系。DEX刺激后的SPC-A1细胞表达SGK-1,在12hr时表达达高峰;细胞免疫组化显示SPC-A1细胞经DEX刺激后GR上调,细胞内GR表达的阳性细胞数明显高于对照组;没有检测到MKP-1表达。结论:DEX对CDDP引起SPC-A1细胞的凋亡有抑制作用。可能的分子机理是通过上调细胞内GR表达,上调其通路下游抗凋亡蛋白SGK-1的表达,导致SPC-A1细胞产生抗凋亡作用。