EGSB反硝化脱硫反应器微生物群落结构及动态分析

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目前,很多研究已证实,通过自养和异养微生物的联合作用可以实现有机废水的反硝化脱硫,并回收单质硫。为了进一步提高自养-异养联合反硝化脱脱硫系统的处理效果,有必要对活性污泥微生物群落结构、功能微生物及其与工艺变动的相关性进行分析,从而指导工艺调控。本文以EGSB型反硝化脱硫反应器的厌氧活性污泥为研究对象,利用PCR-DGGE技术,分析不同工艺运行条件下,微生物群落结构及动态,以期指导工艺运行。本研究针对自养-异养联合反硝化脱硫工艺厌氧活性污泥的特殊性,对PCR-DGGE技术进行了优化。DNA提取方法、PCR反应条件和DGGE图谱的获得等关键操作条件进行了优化。结果表明,优化后的的操作条件可以更快更准确地用于诊断微生物群落及动态。采用优化的PCR-DGGE技术,解析了提高碳硫比、提高硫化物浓度和亚硝酸盐存在条件下,自养-异养反硝化脱硫微生物群落结构及动态,以期确定优化的工艺条件。分析结果表明,提高碳硫比的过程对微生物群落结构影响不大,不同碳硫比条件下功能微生物主要为Sulfurovum和Pseudomonas。提高硫化物浓度的过程,EGSB反应器最终形成了以Sulfurovum和Pseudomonas为主,以Rhodobacterales Clostridium为辅的微生物群落结构。亚硝酸盐制约的对微生物群落结构主要的功能微生物有Sulfurovum、Thauera和Pseudomonas。Sulfurovum具有自养脱硫反硝化功能, Thauera、Pseudomonas可以利用乙酸盐作为碳源,硝酸盐作为电子受体进行异养反硝化作用。亚硝酸盐的存在没有对主要的功能微生物产生抑制作用。通过PCR-DGGE分析微生物群落,表明自养-异养反硝化脱硫工艺运行效果较好时,微生物群落中的自养脱硫反硝化功能菌主要为Sulfurovum,异养反硝化功能菌主要为Pseudomonas。
摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第1章 绪论第8-19页
    1.1 课题背景第8-9页
    1.2 生物脱硫脱氮技术研究进展第9-14页
        1.2.1 反硝化脱硫技术的提出第9-10页
        1.2.2 硫自养反硝化工艺第10-11页
        1.2.3 混养条件下碳氮硫同步脱除第11-14页
        1.2.4 混养条件下碳氮硫同步脱除第14页
    1.3 脱硫脱氮功能微生物第14-17页
        1.3.1 脱硫微生物第14-15页
        1.3.2 脱氮微生物第15-16页
        1.3.3 同步脱硫脱氮细菌第16-17页
    1.4 课题的目的、意义及主要研究内容第17-19页
        1.4.1 课题来源第17页
        1.4.2 研究的目的意义第17-18页
        1.4.3 主要研究内容第18-19页
第2章 实验材料与方法第19-27页
    2.1 试验装置与运行第19-22页
        2.1.1 试验装置第19页
        2.1.2 接种污泥第19-20页
        2.1.3 进水水质第20页
        2.1.4 分析项目和分析方法第20-22页
    2.2 微生物群落结构分析方法第22-27页
        2.2.1 主要分子生物学生化试剂第22页
        2.2.2 主要仪器设备第22-23页
        2.2.3 基因组DNA 提取第23-24页
        2.2.4 PCR 扩增及纯化第24-27页
第3章 PCR-DGGE 技术条件优化第27-32页
    3.1 DNA 提取方法的优化第27-28页
    3.2 PCR 条件及产物纯化方法的优化第28-31页
        3.2.1 PCR 反应体系的优化第28-30页
        3.2.2 PCR 产物纯化方法的优化第30-31页
        3.2.3 最佳的电泳条件第31页
    3.3 本章小结第31-32页
第4章 反硝化脱硫反应器微生物群落结构及动态分析第32-59页
    4.1 碳硫比影响下反硝化脱硫工艺微生物群落结构及动态第32-43页
        4.1.1 反应器启动第32-33页
        4.1.2 硫化物的去除及转化第33-36页
        4.1.3 硝酸盐和乙酸盐的去除效果第36-39页
        4.1.4 碳硫比制约的微生物群落结构及动态分析第39-43页
    4.2 硫化物浓度制约的反硝化脱硫工艺微生物群落结构及动态第43-50页
        4.2.1 反应器的启动第43页
        4.2.2 硫化物的去除及转化第43-45页
        4.2.3 硝酸盐和乙酸盐的的去除效果第45-47页
        4.2.4 硫化物浓度制约的微生物群落结构及动态分析第47-50页
    4.3 亚硝酸盐影响下反硝化脱硫工艺微生物群落结构及动态第50-57页
        4.3.1 亚硝酸盐与硝酸盐共存时反硝化脱硫工艺的运行效果第50-53页
        4.3.2 亚硝酸盐作为唯一电子受体反硝化脱硫工艺的运行效果第53-55页
        4.3.3 亚硝酸盐制约的微生物群落结构及动态第55-57页
    4.4 本章小结第57-59页
结论第59-61页
参考文献第61-67页
攻读学位期间发表的学术论文及其他成果第67-69页
致谢第69页
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