结肠癌血管生成拟态的形态学观察及生成机制

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目的:探讨结肠癌血管生成拟态(VM)现象及其生成的相关机制。方法:体外三维培养结肠癌细胞株SW480,倒置显微镜下观察VM形成情况,透射电镜下观察其超微结构。采用MTT法检测磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K)信号通路抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮(LY294002 )对SW480细胞的增殖抑制率。10μmo1/L LY294002处理SW480细胞72 h,在光学显微镜下观察VM密度,并用逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测骨桥蛋白(OPN)基因,基质金属蛋白酶2(MMP2)基因的水平。Western Blot法检测10μmo1/L LY294002处理SW480细胞24~72 h后蛋白激酶B (PKB),磷酸化蛋白激酶B (p-PKB)蛋白的表达。结果:结肠癌细胞株SW480在体外三维培养条件下能够形成VM,电镜观察结果进一步证实了VM的存在。LY294002作用后SW480细胞的生长明显减慢,抑制率为13.01%~67.55%( P<0.01)且呈良好的时间-剂量效应关系。SW480细胞经10μmo1/L LY294002干预72 h后,VM密度由12.50±3.27下降至2.60±1.07( P<0.01),opn,mmp2 mRNA的表达强度分别为0.31±0.01,0.20±0.04,低于未干预细胞的表达强度0.75±0.03,0.55±0.05 (P<0.01)。10μmo1/L LY294002处理SW480细胞24~72 h后,PKB蛋白表达下降( P<0.01), p-PKB蛋白表达水平无明显变化。结论:LY294002通过下调opn,mmp2 mRNA的表达,抑制结肠癌细胞VM的形成,此过程与抑制PI-3K/PKB通路有关。
英汉缩略语名词对照第5-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-10页
前言第11-12页
第一部分 结肠癌细胞株 SW480 血管生成拟态的形态学研究第12-17页
    1 材料第12-13页
    2 方法第13-14页
    3 结果第14-15页
    4 讨论第15-16页
    5 小结第16-17页
第二部分 PI3K/PKB 信号通路在 SW480 细胞血管生成拟态中 的作用第17-35页
    1 材料第17-21页
    2 方法第21-28页
    3 结果第28-32页
    4 讨论第32-33页
    5 小结第33-35页
全文总结第35-36页
参考文献第36-38页
文献综述 血管生成拟态研究进展第38-46页
致谢第46-47页
攻读硕士研究生期间发表的论文第47页
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论文编号ABS1026317,这篇论文共47页
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