角膜基质细胞通过抑制PPARα的表达促进VEGFr3诱导的角膜新生血管形成
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论文详情
摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第14-24页 |
1.1 角膜新生血管的国内外研究现状 | 第14-21页 |
1.1.1 角膜正常结构 | 第14页 |
1.1.2 角膜新生血管发病机制 | 第14-17页 |
1.1.3 角膜新生血管临床治疗研究进展 | 第17页 |
1.1.4 过氧化物酶体增殖剂激活受体(Peroxisome Proliferator-Activated eceptor,PPARs)研究进展 | 第17-19页 |
1.1.5 脂类代谢紊乱与角膜新生血管的研究进展 | 第19-21页 |
1.2 研究内容和目标 | 第21-23页 |
1.2.1 研究内容 | 第21-22页 |
1.2.2 研究目标 | 第22-23页 |
1.3 研究意义 | 第23-24页 |
第二章 实验材料和方法 | 第24-47页 |
2.1 实验材料 | 第24-30页 |
2.1.1 细胞、实验动物 | 第24页 |
2.1.2 激动剂 | 第24页 |
2.1.3 主要化学试剂和耗材 | 第24-25页 |
2.1.4 抗体 | 第25页 |
2.1.5 哺乳动物细胞培养试剂 | 第25-26页 |
2.1.6 主要仪器 | 第26-27页 |
2.1.7 主要溶液配制 | 第27-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-47页 |
2.2.1 原代小鼠角膜基质细胞的培养 | 第30-31页 |
2.2.2 PPARα选择性激动剂非诺贝特处理小鼠角膜基质细胞 | 第31页 |
2.2.3 全细胞裂解 | 第31-32页 |
2.2.4 PPARα基因敲除小鼠的鉴定 | 第32-33页 |
2.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
2.2.6 PPARα探针的制备 | 第33-38页 |
2.2.7 石蜡切片 | 第38-39页 |
2.2.8 石蜡组织切片原位杂交 | 第39页 |
2.2.9 石蜡切片免疫组化 | 第39-40页 |
2.2.10 冰冻切片 | 第40页 |
2.2.11 冰冻切片油红O染色 | 第40-41页 |
2.2.12 动物实验 | 第41-42页 |
2.2.13 mRNA的提取与逆转录 | 第42-44页 |
2.2.14 角膜蛋白样本的制取 | 第44页 |
2.2.15 蛋白定量 | 第44-45页 |
2.2.16 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45页 |
2.2.17 免疫印迹实验 | 第45-46页 |
2.2.18 统计分析 | 第46-47页 |
第三章 实验结果 | 第47-74页 |
3.1 野生型小鼠角膜碱烧伤后的病理改变 | 第47-51页 |
3.1.1 角膜新生血管的形成 | 第47-49页 |
3.1.2 角膜脂质的积聚 | 第49-51页 |
3.2 野生型小鼠角膜碱烧伤后PPARA表达的抑制 | 第51-55页 |
3.2.1 野生型小鼠角膜碱烧伤后PPARα mRNA和蛋白表达的下调 | 第51-53页 |
3.2.2 野生型小鼠角膜碱烧伤后脂肪酸氧化酶mRNA和蛋白表达的下调 | 第53-55页 |
3.3 野生型小鼠角膜碱烧伤后PPARA表达的抑制与角膜新生血管的形成有关 | 第55-57页 |
3.4 碱烧伤后野生型小鼠角膜VEGFR3和MMP13的表达与PPARA表达的抑制有关 | 第57-59页 |
3.5 PPARA基因的敲除促进小鼠角膜新生血管的形成 | 第59-64页 |
3.5.1 PPARα基因敲除小鼠角膜碱烧伤后的病理改变 | 第59-61页 |
3.5.2 PPARα基因敲除小鼠角膜碱烧伤后脂肪酸氧化酶mRNA和蛋白的表达显著下调 | 第61-63页 |
3.5.3 PPARα基因敲除小鼠角膜的VEGFr3和MMP13表达显著上调 | 第63-64页 |
3.6 PPARA选择性激动剂非诺贝特抑制角膜新生血管形成的机制 | 第64-69页 |
3.6.1 非诺贝特处理碱烧伤后小鼠角膜的病理改变 | 第64-66页 |
3.6.2 非诺贝特促进碱烧伤后小鼠角膜PPARα及脂肪酸氧化代谢酶的表达 | 第66-68页 |
3.6.3 非诺贝特抑制碱烧伤后小鼠角膜VEGFr3和MMP13的表达 | 第68-69页 |
3.7 角膜基质细胞PPARA、VEGFR3及MMP13的表达 | 第69-74页 |
3.7.1 角膜基质细胞PPARα基因的敲除上调VEGFr3和MMP13的表达 | 第69-70页 |
3.7.2 PPARα基因的敲除下调角膜基质细胞脂肪酸氧化代谢酶的表达 | 第70-71页 |
3.7.3 非诺贝特通过促进PPARα的表达抑制角膜基质细胞VEGFr3和MMP13的表达 | 第71-72页 |
3.7.4 非诺贝特促进角膜基质细胞PPARα及其靶基因脂肪酸氧化代谢酶的表达 | 第72-74页 |
第四章 讨论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-83页 |
附录一 英文缩略索引 | 第83-84页 |
附录二 在学期间科研成果 | 第84-85页 |
致谢 | 第85页 |
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