角膜基质细胞通过抑制PPARα的表达促进VEGFr3诱导的角膜新生血管形成

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论文详情
摘要第10-12页
ABSTRACT第12-13页
第一章 前言第14-24页
    1.1 角膜新生血管的国内外研究现状第14-21页
        1.1.1 角膜正常结构第14页
        1.1.2 角膜新生血管发病机制第14-17页
        1.1.3 角膜新生血管临床治疗研究进展第17页
        1.1.4 过氧化物酶体增殖剂激活受体(Peroxisome Proliferator-Activated eceptor,PPARs)研究进展第17-19页
        1.1.5 脂类代谢紊乱与角膜新生血管的研究进展第19-21页
    1.2 研究内容和目标第21-23页
        1.2.1 研究内容第21-22页
        1.2.2 研究目标第22-23页
    1.3 研究意义第23-24页
第二章 实验材料和方法第24-47页
    2.1 实验材料第24-30页
        2.1.1 细胞、实验动物第24页
        2.1.2 激动剂第24页
        2.1.3 主要化学试剂和耗材第24-25页
        2.1.4 抗体第25页
        2.1.5 哺乳动物细胞培养试剂第25-26页
        2.1.6 主要仪器第26-27页
        2.1.7 主要溶液配制第27-30页
    2.2 实验方法第30-47页
        2.2.1 原代小鼠角膜基质细胞的培养第30-31页
        2.2.2 PPARα选择性激动剂非诺贝特处理小鼠角膜基质细胞第31页
        2.2.3 全细胞裂解第31-32页
        2.2.4 PPARα基因敲除小鼠的鉴定第32-33页
        2.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳第33页
        2.2.6 PPARα探针的制备第33-38页
        2.2.7 石蜡切片第38-39页
        2.2.8 石蜡组织切片原位杂交第39页
        2.2.9 石蜡切片免疫组化第39-40页
        2.2.10 冰冻切片第40页
        2.2.11 冰冻切片油红O染色第40-41页
        2.2.12 动物实验第41-42页
        2.2.13 mRNA的提取与逆转录第42-44页
        2.2.14 角膜蛋白样本的制取第44页
        2.2.15 蛋白定量第44-45页
        2.2.16 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第45页
        2.2.17 免疫印迹实验第45-46页
        2.2.18 统计分析第46-47页
第三章 实验结果第47-74页
    3.1 野生型小鼠角膜碱烧伤后的病理改变第47-51页
        3.1.1 角膜新生血管的形成第47-49页
        3.1.2 角膜脂质的积聚第49-51页
    3.2 野生型小鼠角膜碱烧伤后PPARA表达的抑制第51-55页
        3.2.1 野生型小鼠角膜碱烧伤后PPARα mRNA和蛋白表达的下调第51-53页
        3.2.2 野生型小鼠角膜碱烧伤后脂肪酸氧化酶mRNA和蛋白表达的下调第53-55页
    3.3 野生型小鼠角膜碱烧伤后PPARA表达的抑制与角膜新生血管的形成有关第55-57页
    3.4 碱烧伤后野生型小鼠角膜VEGFR3和MMP13的表达与PPARA表达的抑制有关第57-59页
    3.5 PPARA基因的敲除促进小鼠角膜新生血管的形成第59-64页
        3.5.1 PPARα基因敲除小鼠角膜碱烧伤后的病理改变第59-61页
        3.5.2 PPARα基因敲除小鼠角膜碱烧伤后脂肪酸氧化酶mRNA和蛋白的表达显著下调第61-63页
        3.5.3 PPARα基因敲除小鼠角膜的VEGFr3和MMP13表达显著上调第63-64页
    3.6 PPARA选择性激动剂非诺贝特抑制角膜新生血管形成的机制第64-69页
        3.6.1 非诺贝特处理碱烧伤后小鼠角膜的病理改变第64-66页
        3.6.2 非诺贝特促进碱烧伤后小鼠角膜PPARα及脂肪酸氧化代谢酶的表达第66-68页
        3.6.3 非诺贝特抑制碱烧伤后小鼠角膜VEGFr3和MMP13的表达第68-69页
    3.7 角膜基质细胞PPARA、VEGFR3及MMP13的表达第69-74页
        3.7.1 角膜基质细胞PPARα基因的敲除上调VEGFr3和MMP13的表达第69-70页
        3.7.2 PPARα基因的敲除下调角膜基质细胞脂肪酸氧化代谢酶的表达第70-71页
        3.7.3 非诺贝特通过促进PPARα的表达抑制角膜基质细胞VEGFr3和MMP13的表达第71-72页
        3.7.4 非诺贝特促进角膜基质细胞PPARα及其靶基因脂肪酸氧化代谢酶的表达第72-74页
第四章 讨论第74-76页
参考文献第76-83页
附录一 英文缩略索引第83-84页
附录二 在学期间科研成果第84-85页
致谢第85页
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