目的：本研究旨在通过皮下注射异丙肾上腺素(ISO)建立心肌缺血性损伤动物模型,观察心肌损伤状态下DAA-Ⅰ对大鼠TNF-a血清含量,心肌组织NF-KB基因表达情况的影响,从而评价DAA-Ⅰ及联用丹参素抗心肌缺血性损伤作用,以期为药物的临床研究提供实验依据。方法：1.实验动物分组：SPF级SD系大鼠(雌雄各半)采用随机化分组,设立正常对照组、模型组、DAA-Ⅰ防治组、DAA-Ⅰ治疗组、DAA-Ⅰ+丹参素组、丹参素治疗组、缬沙坦治疗组。2.疾病动物模型复制：利用ISO对心脏的正性肌力和明显缩率作用,连续两天对大鼠行ISO s.c.注射,首次用量4mg／kg,二次用量2mg／kg,诱导大鼠发生心肌缺血性损伤。3.实验动物给药：自ISO处理第6天起,正常对照组、模型组大鼠给予等容量0.9%NSi.p.注射,DAA-Ⅰ治疗组、DAA-Ⅰ+丹参素组、丹参素组大鼠分别予DAA-I(1013pmol/kg/d)、丹参素(50mg／kg／d)i.p.注射,缬沙坦组大鼠予缬沙坦(30mgm／kg／d)灌胃治疗,共给药7天；DAA-Ⅰ防治组大鼠自ISO处理第1天起连续给予DAA-Ⅰ(1013pmol／kg／d),共12天。4.实验指标检测：各实验组大鼠分别给予相关药物处理后,于制模后第13天,腹主动脉取血以ELISA法检测血清TNF-α含量,取左心室作心肌组织病理切片,并以RT-PCR方法测定左室心肌NF-κB p65基因表达。结果：1.模型组大鼠血清TNF-α的含量为46.37±7.47(ng／L),显著高于正常对照组水平(P<0.01),DAA-Ⅰ+丹参素组与正常对照组大鼠血清TNF-α水平相比差别有统计学意义(P<0.05),其它治疗组与之比较则有显著性差异(P<0.01)；与模型组比较,DAA-Ⅰ防治组、DAA-Ⅰ治疗组、DAA-Ⅰ+丹参素组、丹参素组和缬沙坦组的大鼠血清TNF-α含量均有显著降低(P<0.01),TNF-α含量分别为34.80±7.76、34.82±3.55、30.85±5.08、32.69±5.88、36.60±7.87(ng／L)；各治疗组之间进行比较则没有统计学差别(P>0.05)。2.与正常对照组比较,模型组NF-κB p65 mRNA的表达显著增加(0.568±0.085,P<0.01),各治疗组NF-κB的基因表达也有不同程度的增加,均具有显著的统计学意义(P<0.01)；与模型组比较,DAA-Ⅰ治疗组、缬沙坦组的基因表达有统计学意义(P<0.05),NF-κB/β-actin灰度比值分别为0.462±0.057、0.479±0.073,其它治疗组NF-κB的基因表达均有显著差异性(P<0.01)；各治疗组之间比较,DAA-Ⅰ+丹参素组的基因表达水平(0.375±0.074)低于缬沙坦组的表达水平(P<0.05),其它各组比较则无统计学差别(P>0.05)。3.正常对照组大鼠左心室组织心肌纤维结构清晰、排列规则、核染色均匀,心肌细胞间隙紧密而无水肿及纤维化改变；模型组大鼠心肌可见明显水样变性,细胞水肿,核染色呈深染,伴血管出血、炎症细胞浸润,心肌纤维萎缩、排列紊乱,心肌细胞间隙增宽等病理损伤改变；DAA-Ⅰ防治组、DAA-Ⅰ治疗组、DAA-Ⅰ+丹参素组、缬沙坦组及丹参素组大鼠心肌病理损伤均较模型组有所改善。结论：1.DAA-Ⅰ具有抗ISO致大鼠心肌缺血损伤的作用,这种心血管保护作用可能与抑制NF-κB、TNF-α等因子的释放、基因表达有关。2.DAA-Ⅰ对心肌细胞缺血缺氧过程中的早期干预可能产生积极影响,对于改善RAAS病理生理的不良趋向不亚于ARB类药物。3.丹参素、缬沙坦单用均有改善缺血损伤的效果,丹参素与DAA-Ⅰ联合应用具有显著的叠加疗效,对于提高IHD的治疗效果,开拓中西医结合防治心血管疾病的临床思路具有一定的实用意义。
