目的：本研究旨在通过缓慢颅内加压法建立猪脑死亡模型并进行甲泼尼龙琥珀酸钠干预治疗,观察甲泼尼龙琥珀酸钠对猪脑死亡后血清IL-1、IL-6、TNF-α水平和心脏组织IL-1mRNA、 IL-6mRNA及TNF-Qα mRNA的表达,心肌组织含水量以及强心药用量的多少,光、电镜观察心脏超微结构的变化评价甲强龙对心脏的保护作用并探讨甲泼尼龙琥珀酸钠干预治疗对猪脑死亡心脏供体的保护作用。方法：12头健康版纳小耳猪随机分为2组(n=6),对照组(A组)和实验组(B组)。俩组均静脉全身麻醉后行气管切开插管,呼吸机辅助呼吸,颈内动静脉插管、开颅术并颅内放置Foley气囊导管后,Foley气囊导管行颅内加压建立脑死亡模型并维持10h,对照组仅给予林格液和多巴胺及多巴酚丁胺(10-20mg/Kg)维持CVP为6-10cmH20,MAP为60mmHg。若发生尿崩症应用精氨酸加压素,上述所有的用药量及时间以及尿量均详细记录。实验组动物在建立脑死亡模型前半小时静脉输注甲泼尼龙琥珀酸钠15mg/Kg,应用林格液和多巴胺及多巴酚丁胺维持CVP为6-10cmH20, MAP为60mmHg。若发生尿崩症应用精氨酸加压素,药量和时间及尿量也详细记录。俩组实验过程中除采用药物干预外,其他都相同。应用缓慢间断颅内加压法建立脑死亡模型,通过呼吸、循环支持维持实验动物脑死亡状态10小时,10小时后撤除呼吸、循环支持。俩组实验动物分别在脑死亡10h内取动脉血15ml保存备用(每2h/次),实验末期取左心室心肌组织3块各约1g分别保存备用。结果：1.在通过缓慢颅内加压法建立猪脑死亡模型中,12只猪术中手术成功率为100%,术后10h模型成活率80%,造模型过程中死亡两只,研究终点共有10只猪。失败原因1例可能因为脑死亡实验过程中脑组织破坏严重导致死亡,另1例在实验过程中频发室颤抢救无效死亡。2.强心药物用量：对照组在通过缓慢颅内加压法建立猪脑死亡模型后,后期随着心功能的逐渐下降,平均动脉压(MAP)降低,中心静脉压(CVP)升高,呈低血压状态,需用血管活性药物多巴胺及多巴酚丁胺等才能维持基本血压。实验组在用甲泼尼龙琥珀酸钠干预治疗后,平均动脉压(MAP),中心静脉压(CVP)较对照组明显提高而且多巴胺及多巴酚丁胺等用量明显减少。提示在甲泼尼龙琥珀酸钠作用下猪脑死亡后的心功能明显提高。3.血液炎症因子变化：对照组和实验组两组血清IL-1、 IL-6、TNF-α水平变化具有显著性差异(P<0.05)。实验组较对照组血清IL-l、IL-6、TNF-α水平减少。4.心脏组织炎症因子mRNA的表达：对照组和实验组两组心脏组织IL-1mRNA、IL-6mRNA及TNF-α mRNA的表达水平变化具有显著性差异(P<0.05)。实验组较对照组心脏组织炎症因子mRNA的表达明显降低。5.心肌组织含水量：对照组和实验组两组心脏组织心肌含水量水平变化具有显著性差异(P<0.05)。实验组较对照组心肌组织含水量显著减少。6.心肌电镜下显示：对照组心肌细胞表现为严重的线粒体空泡变性及心肌纤维断裂,心肌间质严重水肿部分区域有线粒体崩解,肌浆网扩张；实验组心肌细胞表现为轻度的线粒体空泡变性和心肌纤维断裂,心肌间质水肿减轻,部分线粒体崩解。7.心肌组织电镜下观察：对照组心肌间质水肿,部分心肌纤维颗粒变性,心肌间质血管呈收缩状态,肌纤维水样变性,胞浆和肌原纤维颜色变浅,炎细胞浸润,局部可见出血。实验组心肌间质水肿、心肌纤维颗粒变性减轻,炎细胞浸润减少。结论：1.应用改进的缓慢间断颅内加压法并监测猪脑死亡模型,成功率和可重复性高,更符合临床脑死亡的发展过程,经有效的呼吸和循环支持,脑死亡状态可稳定维持。2.脑死亡可导致猪脑死亡心肌组织的损伤,随着脑死亡时间的延长可出现形态学改变。3.脑死亡可导致猪血清炎症因子IL-1、 IL-6、 TNF-α释放增加,心肌组织IL-lmRNA、 IL-6mRNA及TNF-α mRNA的表达增加,使用甲泼尼龙琥珀酸钠干预后炎症因子IL-1、 IL-6、 TNF-α释放减少,心肌组织IL-1mRNA、 IL-6mRNA及TNF-α mRNA的表达降低。4.甲泼尼龙琥珀酸钠对猪脑死亡心肌损伤具有一定的保护作用。
