珊瑚代谢产物种类繁多、结构新颖,是海洋天然产物三大来源之一。其共附生微生物可能是这些代谢产物的真正产生者。为了寻找新颖结构的活性化合物,本论文采用化学与生物学相集成的筛选方法,开展了对珊瑚共附生真菌的筛选及2株共附生真菌的次生代谢产物的研究工作。内容包括：珊瑚共附生真菌的分离与天才菌株的筛选；发酵菌株发酵条件的优化及细胞毒活性成分的追踪分离；单体化合物的结构解析；单体化合物的细胞毒活性初步评价。对采自海南陵水、三亚、临高、万宁港、广西涠洲、广东湛江的珊瑚样品中分离获得198株共附生真菌,运用集成化学和生物学的筛选方法最终确定5株为天才菌株,并选定其中的两株Aspergillus versicolor LCJ-5-4和Penicillium sp. gxwz406作为本论文的目标菌株。对这两株目标菌株发酵条件做了优化,确定了优化培养基和培养条件并进行了大量发酵,得到发酵产物(粗提物)；采用薄层色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相高效液相色谱等手段分离其中的活性化合物；通过解析波谱数据并结合理化常数阐明了21个化合物的结构。其中从杂色曲霉Aspergillus versicolor LCJ-5-4的发酵产物中分离鉴定了16个化合物：versitides A-C (1-3), cottoquinazolines B-D (4-6), glyantrypine (7), (Z)-5-(2,3-dihydroxybutylidene)furan-2(5H)-one (8), (E)-5-(2,3-dihydroxybutylidene)furan-2(5H)-one(9),-tetraorcinol (10), diorcinol (11), cordyol C (12), versicolorin B (13), 1,3,6,8-tetrahydroxy-9,10-anthraquinone (14), versicol (15), averufanin (16);从青霉Penicillium sp. gxwz406的发酵产物分离鉴定了5个化合物：S(-)-2-(2-hydroxy propanamido)benzamide (17), R(+)-chrysogine (18),2-pyruvylaminobenzamide (19), nicotinamide (20), and 2’,3’-dihydrosorbicillin (21)。其中9个化合物(1-6、8-10)为新化合物!运用MTT法对分离获得的单体化合物的抗肿瘤活性进行了初步评价。结果表明：菌株Penicillium sp. gxwz406的主产物化合物19对两种癌细胞(Hela和P388)都表现较弱的活性,IC50分别为10.6和15.6μM。综上所述,本文采用集成筛选的方法获得5株珊瑚共附生的天才菌株,从其中2株真菌的发酵产物中分离鉴定了21个单体化合物,其中9个为新化合物。说明我们集成筛选寻找活性次生代谢产物的的方法是可行的,为抗肿瘤药物的研究提供了新化合物及其资源菌株。
