摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第9-13页 |
1.1 白桦的研究进展 | 第9页 |
1.2 AP2基因及其转录因子家族的研究进展 | 第9-10页 |
1.3 启动子的研究进展 | 第10-12页 |
1.3.1 结构及分类 | 第10-11页 |
1.3.2 克隆及分析方法 | 第11-12页 |
1.4 研究的目的意义 | 第12-13页 |
2 BpAP2基因启动子及其缺失片段的克隆与表达分析 | 第13-26页 |
2.1 实验材料 | 第13页 |
2.1.1 植物材料 | 第13页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第13页 |
2.1.3 主要试剂 | 第13页 |
2.2 实验方法 | 第13-17页 |
2.2.1 白桦组培苗DNA的提取 | 第13页 |
2.2.2 BpAP2基因启动子及其系列缺失片段的扩增 | 第13-14页 |
2.2.3 TA克隆 | 第14-15页 |
2.2.4 目的基因与表达载体的连接 | 第15页 |
2.2.5 重组质粒转化感受态 | 第15-16页 |
2.2.6 启动子功能元件分析 | 第16页 |
2.2.7 农杆菌渗透法转化白桦及拟南芥 | 第16页 |
2.2.8 GUS组织化学染色分析 | 第16-17页 |
2.2.9 激素处理转化后的拟南芥 | 第17页 |
2.2.10 qRT-PCR表达模式分析 | 第17页 |
2.3 结果与分析 | 第17-25页 |
2.3.1 BpAP2基因启动子及其系列缺失片段表达载体的构建 | 第17-19页 |
2.3.2 白桦BpAP2基因系列启动子序列分析及顺式元件预测 | 第19-22页 |
2.3.3 proBpAP2及其系列缺失片段的转录活性分析 | 第22-24页 |
2.3.4 激素对白桦BpAP2启动子活性的影响 | 第24-25页 |
2.4 讨论 | 第25-26页 |
3 BpAP2基因过表达载体的构建与遗传转化 | 第26-36页 |
3.1 实验材料 | 第26页 |
3.1.1 植物材料 | 第26页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第26页 |
3.1.3 主要试剂 | 第26页 |
3.2 实验方法 | 第26-30页 |
3.2.1 CTAB法提取白桦RNA | 第26-27页 |
3.2.2 反转录成cDNA | 第27页 |
3.2.3 BpAP2基因编码区的扩增 | 第27-28页 |
3.2.4 TA克隆 | 第28页 |
3.2.5 目的基因与表达载体的连接 | 第28页 |
3.2.6 BpAP2转基因植物的获得 | 第28-29页 |
3.2.7 形态学观察及数据统计 | 第29-30页 |
3.2.8 qRT-PCR表达模式分析 | 第30页 |
3.3 结果与分析 | 第30-34页 |
3.3.1 BpAP2基因植物过表达载体的构建 | 第30-31页 |
3.3.2 BpAP2过表达载体转化拟南芥 | 第31-32页 |
3.3.3 BpAP2转基因拟南芥的形态观察及数据统计 | 第32-33页 |
3.3.4 BpAP2基因对拟南芥根毛和毛状体生长的影响 | 第33-34页 |
3.4 讨论 | 第34-36页 |
结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-44页 |
附录 | 第44-45页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |