深海沉积物微生物多样性研究及一株近海沉积物细菌多相分类鉴定
富钴结壳区论文 多金属结核区论文 热液硫化区论文 微生物多样性论文
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本研究采用非培养的方法,从太平洋海山富钴结壳区P20082站点、太平洋多金属结核区WS200801站点及印度洋热液硫化物区TVG19站点沉积物样品中直接抽提DNA,分别构建细菌和古菌16S rRNA文库,经测序及比对表明,三个站点的细菌文库分别涵盖了14、12、8个类群的细菌,包括变形菌门、疣微菌门、芽单胞菌门、拟杆菌门、浮霉菌门、酸杆菌门、放线菌门、硝化螺旋菌门、绿弯菌门、TM7、OP11、OD1、蓝细菌、脱铁杆菌门、厚壁菌门及衣原体门,三个站点优势类群均为变形菌门细菌。热液硫化物区站点古菌文库包括泉古菌门和广古菌门,而P20082站点和WS200801站点多样性较低,只有泉古菌门类群。从太平洋海山富钴结壳区样品中分离到一株钴锰耐受菌C5,经16S rDNA序列比对与Brachybacterium paraconglomeratum相似性为100%,锰最大耐受浓度为40 mM,钴最大耐受浓度为5 mM,推测可能为锰氧化菌。从苍南近海沉积物中分离到一株革兰氏阴性细菌CN85~T,通过传统分类、化学分类及分子生物学方法结合,对其进行鉴定,研究表明CN85~T是Microbulbifer属的新种。
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
1 深海环境特点 | 第9-10页 |
1.1 深海富钴结壳区 | 第9页 |
1.2 深海多金属结核区 | 第9页 |
1.3 深海热液口 | 第9-10页 |
2 深海沉积物微生物多样性研究 | 第10-12页 |
2.1 纯培养法 | 第10-11页 |
2.2 非培养分析法 | 第11-12页 |
3 微生物多相分类研究背景 | 第12-15页 |
3.1 细菌分类学 | 第12-13页 |
3.2 多相分类学 | 第13-15页 |
4 微生物与锰、钴氧化 | 第15页 |
5 研究的目的及意义 | 第15-17页 |
第二章 深海沉积物微生物多样性及分析 | 第17-65页 |
1.材料和方法 | 第17-19页 |
1.1 样品 | 第17页 |
1.2 仪器和试剂 | 第17-18页 |
1.3 实验方法 | 第18-19页 |
2.结果 | 第19-62页 |
2.1 深海沉积物细菌16S rDNA序列分析结果 | 第19-46页 |
2.2 深海沉积物不同站点细菌种群的分布 | 第46-52页 |
2.3 不同站点深海沉积物细菌分布比较 | 第52-54页 |
2.4 深海沉积物古菌16S rDNA序列分析结果 | 第54-59页 |
2.5 深海沉积物不同站点古菌种群的分布 | 第59页 |
2.6 不同站点深海沉积物多样性比较结果 | 第59-62页 |
3 讨论 | 第62-65页 |
第三章 一株钴锰耐受细菌的分离及研究 | 第65-69页 |
1 材料与方法 | 第65-66页 |
1.1 样品的采集 | 第65页 |
1.2 菌株的分离和培养 | 第65页 |
1.3 细菌16S rRNA基因PCR及测序 | 第65-66页 |
1.4 钴锰耐受试验 | 第66页 |
2 结果 | 第66-67页 |
2.1 菌落形态 | 第66-67页 |
3 讨论 | 第67-68页 |
4 小结 | 第68-69页 |
第四章 一株近海疑似新种的多相分类研究 | 第69-80页 |
1 材料与方法 | 第69-72页 |
1.1 样品的采集及其环境 | 第69页 |
1.2 菌株分离与培养条件 | 第69页 |
1.3 多相分类菌株和参比菌株 | 第69页 |
1.4 表型特征分析 | 第69-70页 |
1.5 脂肪酸成分分析 | 第70页 |
1.6 呼吸醌类型分析 | 第70-71页 |
1.7 细菌基因组DNA的提取 | 第71-72页 |
1.8 基于细菌16S rRNA基因序列系统发育学分析 | 第72页 |
1.9 基因组DNA G+C mol%含量分析 | 第72页 |
1.10 与相近种间的DNA-DNA同源性分析 | 第72页 |
2 结果与讨论 | 第72-80页 |
2.1 细菌的表型特征 | 第72-77页 |
2.2 脂肪酸成分分析 | 第77页 |
2.3 基于16S rRNA基因系统发育分析 | 第77页 |
2.4 基因组的DNA G+C含量 | 第77页 |
2.5 与相近种的DNA-DNA同源性 | 第77-78页 |
2.6 呼吸醌类型分析 | 第78页 |
2.7 讨论 | 第78-80页 |
附录 | 第80-86页 |
参考文献 | 第86-94页 |
发表论文 | 第94-95页 |
致谢 | 第95页 |
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