短梗霉多糖(pullulan)是出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)在培养过程中利用糖代谢产生的细胞外水溶性多糖。短梗霉多糖具有安全,无毒,耐热,耐盐,耐酸碱,可塑性强,成膜性好,阻氧能力强,受季节、气候影响不大等独特的理化和生物学特性,在食品包装、医药制造、水果和海产品保鲜、化妆品工业、农业种子保护和烟草制造工业等众多的领域中广泛应用,这种具有较大的开发价值和广阔的应用前景的多功能性的新型生物制品被众多的科学家所关注、青睐。伴随着短梗酶多糖的生产,出芽短梗霉会分泌出黑色或墨绿色的色素,严重影响了多糖的分离提纯,进而阻止了短梗酶多糖的大规模的生产应用。本实验通过对出芽短梗霉进行甲基磺酸乙酯(Ethyl methanesulfonate, EMS)和紫外线诱变,旨在从根本上解决多糖色素问题,并且使多糖的产率也有所提高,为工业化生产短梗霉多糖提供基础研究数据和可借鉴的方法。在EMS终浓度0.2mol/L、作用时间40-60min和30W的紫外灯照射距离30cm、照射时间1.5-2.5min条件下诱变获得了一株稳定遗传的多糖产量高、色素低的出芽短梗霉突变株UV60,产量为22.1g/L,与出发菌株比较,胞外多糖产量提高了29.42%。为了研究发酵培养基中不同组份对短梗霉的生长和多糖的生产的影响,本实验先进行了碳源、氮源的选择,又对最佳的碳源、氮源及其他培养基组分进行了单因素及正交实验,获得了最优的培养基组成,即蔗糖50.0g/L,酵母膏1g/L,NaCl2g/L, MgSO40.3g/L,K2HPO43.0g/L,(NH4)28O40.7g/L,此时多糖产量为27.24g/L。为研究不同的微量元素及其浓度对短梗霉多糖产量的影响,对CrCl3、ZnSO4、 MnSO4和C5H11NO2Se进行了单因素及正交试验获得了最优的微量元素组成,即CrCl30.5mg/L, ZnSO40.15mg/L, MnSO40.2mg/L, C5H11NO2Se12.5mg/L时发酵的效果最好,此时多糖产量为28.9g/L。最后用发酵罐研究了出芽短梗霉的发酵工艺,通过对菌体发酵的搅拌转速和pH控制方式进行研究,最终确定的搅拌转速为250r/min,恒定pH为6.5。在该条件下,多糖产量最大。