摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第12-26页 |
1.1 糖类物质的研究进展 | 第12页 |
1.2 果胶多糖的研究进展 | 第12-19页 |
1.2.1 果胶多糖的来源及其分类 | 第13-14页 |
1.2.1.1 果胶的分类 | 第13页 |
1.2.1.2 果胶的来源 | 第13-14页 |
1.2.2 果胶多糖的分子结构和化学组成 | 第14-16页 |
1.2.3 果胶多糖的提取 | 第16-18页 |
1.2.3.1 酸萃取法 | 第16-17页 |
1.2.3.2 碱萃取法 | 第17页 |
1.2.3.3 草酸铵提取法 | 第17-18页 |
1.2.3.4 微生物酶法 | 第18页 |
1.2.4 果胶多糖的应用研究 | 第18-19页 |
1.2.4.1 果胶在食品工业中的应用 | 第18-19页 |
1.2.4.2 果胶在医药行业的应用 | 第19页 |
1.3 寡聚半乳糖醛酸的研究进展 | 第19-24页 |
1.3.1 寡聚糖醛酸的化学结构 | 第19-20页 |
1.3.2 寡聚半乳糖醛酸的来源 | 第20-21页 |
1.3.2.1 从天然植物中提取 | 第20页 |
1.3.2.2 化学合成法 | 第20页 |
1.3.2.3 酶法降解制备寡聚半乳糖醛酸 | 第20-21页 |
1.3.3 寡聚半乳糖醛酸的分离 | 第21页 |
1.3.4 寡聚半乳糖醛酸的检测方法 | 第21-23页 |
1.3.4.1 薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC) | 第21-22页 |
1.3.4.2 气相色谱法(gas chromatography,GC) | 第22页 |
1.3.4.3 脉冲安培检测法(HPAEC-PAD) | 第22页 |
1.3.4.4 质谱(Mass spectrometry,MS) | 第22-23页 |
1.3.4.5 红外光谱(IR) | 第23页 |
1.3.5 寡聚半乳糖醛酸的生物活性 | 第23-24页 |
1.3.5.1 寡聚半乳糖醛酸作为诱导子 | 第23-24页 |
1.3.5.2 寡聚半乳糖醛酸调节植物的生长发育 | 第24页 |
1.4 研究的目的意义 | 第24-26页 |
第二章 苹果果胶多糖的理化性质以及抑制HT-29细胞增殖活性的初步研究 | 第26-44页 |
2.1 实验部分 | 第26-31页 |
2.1.1 实验材料与试剂 | 第26页 |
2.1.2 实验仪器与设备 | 第26页 |
2.1.3 实验方法 | 第26-31页 |
2.1.3.1 苹果果胶多糖的提取 | 第26-27页 |
2.1.3.2 四种果胶多糖的糖组成分析 | 第27-28页 |
2.1.3.3 果胶多糖的总糖含量测定 | 第28页 |
2.1.3.4 果胶多糖的糖醛酸含量测定 | 第28-29页 |
2.1.3.5 果胶多糖的蛋白含量测定 | 第29页 |
2.1.3.6 果胶多糖的分子量测定 | 第29-30页 |
2.1.3.7 果胶多糖的红外(IR)分析 | 第30页 |
2.1.3.8 果胶多糖对HT-29细胞增殖的抑制作用 | 第30-31页 |
2.2 实验结果与分析 | 第31-42页 |
2.2.1 果胶多糖的提取 | 第31页 |
2.2.2 果胶多糖的单糖组成分析 | 第31-33页 |
2.2.3 果胶多糖的总糖含量测定 | 第33-34页 |
2.2.4 果胶多糖的糖醛酸含量测定 | 第34-35页 |
2.2.5 蛋白含量测定 | 第35-36页 |
2.2.6 果胶多糖的分子量测定 | 第36-38页 |
2.2.7 果胶多糖的红外分析 | 第38-40页 |
2.2.8 果胶多糖抑制HT-29细胞增殖的活性 | 第40-42页 |
2.3 小结 | 第42-44页 |
第三章 苹果果胶多糖CSP中寡糖的分离纯化 | 第44-57页 |
3.1 实验部分 | 第44-47页 |
3.1.1 实验材料与试剂 | 第44页 |
3.1.1.1 实验材料 | 第44页 |
3.1.1.2 实验试剂 | 第44页 |
3.1.2 实验仪器与设备 | 第44页 |
3.1.3 实验方法 | 第44-47页 |
3.1.3.1 CSP的直接酶解 | 第44-45页 |
3.1.3.2 CSP果胶酸的酶解 | 第45页 |
3.1.3.3 CSP寡糖混合物的制备 | 第45页 |
3.1.3.4 CSP寡糖混合物的分离纯化 | 第45-47页 |
3.1.3.4.1 寡聚半乳糖醛酸的分离纯化及制备 | 第45-46页 |
3.1.3.4.2 寡聚半乳糖醛酸的TLC和ESI-MS检测 | 第46-47页 |
3.1.3.4.3 中性寡糖的分离纯化 | 第47页 |
3.2 实验结果分析 | 第47-55页 |
3.2.1 CSP的直接酶解 | 第47-48页 |
3.2.2 CSP果胶酸的酶解 | 第48-49页 |
3.2.3 CSP寡聚半乳糖醛酸的分离制备及ESI-MS分析 | 第49-53页 |
3.2.3.1 酸性寡糖混合物的制备及ESI-MS分析 | 第49-50页 |
3.2.3.2 CSP酸性寡糖混合物的分离 | 第50-51页 |
3.2.3.3 寡聚糖醛酸的制备及其TLC、ESI-MS分析 | 第51-53页 |
3.2.4 CSP中性寡糖混合物的分离 | 第53-55页 |
3.2.4.1 CSP中性寡糖混合物的制备及ESI-MS分析 | 第53-54页 |
3.2.4.2 中性寡糖混合物的分离纯化 | 第54-55页 |
3.2.4.2.1 聚丙烯酰胺凝胶(Bio-Gel-P4)过滤色谱的分离原理 | 第54页 |
3.2.4.2.2 中性寡糖混合物的分离纯化及其ESI-MS分析 | 第54-55页 |
3.3 本章小节 | 第55-57页 |
第四章 寡聚半乳糖醛酸对肿瘤细胞增殖的影响 | 第57-66页 |
4.1 实验部分 | 第57-59页 |
4.1.1 实验材料、试剂与仪器 | 第57页 |
4.1.1.1 实验材料 | 第57页 |
4.1.1.2 实验试剂 | 第57页 |
4.1.1.3 实验仪器 | 第57页 |
4.1.2 实验方法 | 第57-59页 |
4.1.2.1 溶液配制 | 第57-58页 |
4.1.2.2 细胞培养 | 第58页 |
4.1.2.3 MTT比色法测定几种肿瘤细胞的增殖抑制率 | 第58-59页 |
4.2 结果与分析 | 第59-65页 |
4.2.1 寡聚半乳糖醛酸(GalA2~GalA5)的细胞生长抑制率 | 第59-60页 |
4.2.2 不同浓度的寡聚半乳糖醛酸对四种细胞株增殖的影响 | 第60-65页 |
4.2.2.1 四种寡聚半乳糖醛酸对人肺癌细胞A549增殖的影响 | 第60-61页 |
4.2.2.2 四种寡聚半乳糖醛酸对人结肠癌细胞HT-29增殖的影响 | 第61-62页 |
4.2.2.3 四种寡聚半乳糖醛酸对人结肠癌细胞LoVo增殖的影响 | 第62-63页 |
4.2.2.4 四种寡聚半乳糖醛酸对人肺癌细胞H1299增殖的影响 | 第63-65页 |
4.3 讨论 | 第65页 |
4.4 本章小结 | 第65-66页 |
第五章 寡聚半乳糖醛酸对小鼠脾细胞增殖反应的影响 | 第66-71页 |
5.1 实验部分 | 第66-68页 |
5.1.1 实验材料、试剂及仪器 | 第66页 |
5.1.1.1 实验材料 | 第66页 |
5.1.1.2 实验试剂及仪器 | 第66页 |
5.1.2 实验方法 | 第66-68页 |
5.1.2.1 体外药物(寡糖样品)的配制方式 | 第66页 |
5.1.2.2 寡聚半乳糖醛酸对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 | 第66-68页 |
5.1.2.2.1 脾细胞悬液的制备 | 第66-67页 |
5.1.2.2.2 脾细胞增殖实验 | 第67-68页 |
5.2 实验结果 | 第68-69页 |
5.2.1 各个聚合度的寡聚半乳糖醛酸对小鼠脾细胞增殖反应的影响 | 第68页 |
5.2.2 寡聚半乳糖醛酸与Con A、LPS丝裂原联用对小鼠脾细胞增殖反应对的影响 | 第68-69页 |
5.3 本章小结 | 第69-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
攻读硕士期间取得的学术成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |