本试验系统研究饲粮中添加25-OH-D3对轮状病毒攻毒和脂多糖免疫应激下断奶仔猪生长性能、肠道免疫功能和免疫应答的影响和作用机理,确定饲粮25(OH)D3的适宜添加水平。包括两个试验。试验一研究饲粮添加25-OH-D3对轮状病毒攻毒的断奶仔猪生产性能和肠道免疫功能的影响。试验采用2×2因子设计,选取48头28日龄平均体重7.35kg的杜长大断奶仔猪,分为4个处理,每个处理12头猪,试验期21天。处理C—、T—为未攻毒处理,C+、T+为攻毒处理,试验开始时仔猪口服接种1×106TcID人轮状病毒。处理C—、C+的试验饲粮添加220IU/kg的25-OH-D3,处理T—、T+的试验饲粮添加2200IU/kg的25-OH-D3。考察仔猪生产性能,血清和回肠内容物抗体、细胞因子水平,回肠绒毛高度和隐窝深度,回肠上皮内淋巴细胞、黏膜固有层淋巴细胞和肠系膜淋巴结的CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平。结果显示：断奶仔猪饲粮添加2200 IU/kg的25-OH-D3：①降低未攻毒和攻毒仔猪试验4-14天腹泻率、腹泻指数。②提高未攻毒和攻毒仔猪试验0-15天日增重、采食量和饲料转化率。③对回肠绒毛高度和隐窝深度没有显著影响。④提高攻毒仔猪试验第5、15、21天血清和肠道内容物轮状病毒抗体水平,提高试验第5、15、21天未攻毒和第21天攻毒仔猪肠内容物总IgG、IgM、IgA水平,降低试验第5、15、21天未攻毒和攻毒仔猪血清总IgG、IgM、IgA水平。⑤提高试验第5、15、21天未攻毒和攻毒仔猪回肠上皮内淋巴细胞、黏膜固有层淋巴细胞的CD3+、CD4+T细胞水平,降低试验第5、15天CD8+T细胞比例,提高试验第5、15和21天CD4+/CD8+T细胞的比值；对仔猪肠系膜淋巴结的CDT细胞水平没有显著影响。⑥降低试验第15、21天未攻毒仔猪血清和肠内容物IL-2水平、降低攻毒仔猪肠试验第5、15、21天的肠内容物IL-2水平；提高试验5、15、21天未攻毒和攻毒仔猪血清和肠内容物IL-4水平；降低未攻毒仔猪试验第5、15天的血清和肠内容物IL-6水平,降低攻毒仔猪试验第5、15和21天肠内容物IL-6水平；降低试验第5、15、21天未攻毒和攻毒仔猪肠内容物IFN-γ水平,对血清IFN-γ没有显著影响。试验二研究饲粮维生素D3水平对断奶仔猪生产性能和机体对脂多糖的免疫应答的影响。试验分为两个阶段,第一阶段为0-21天,研究饲粮中添加不同水平维生素D3对正常断奶仔猪生产性能的影响。采用单因子设计,设7个处理,每个处理4个重复,每个重复4头猪。试验动物为112头21日龄平均体重6.73kg的杜长大断奶仔猪。试验饲粮分别添加：0、440、880、1320、1760、2200IU/kg的25-OH-D3和2200IU/kg的D3。第二阶段为21-28天,研究25-OH-D3对脂多糖诱导免疫应激的影响。第一阶段试验结束后立即将每个处理的2个重复作为对照组,2个重复作为LPS应激处理组。LPS应激仔猪在试验第21、24、27天早上8点肌肉注射100μg/kg脂多糖。考察仔猪生产性能、血清Ig、细胞因子IL-6、TNF-α和胰岛素样生长因子-Ⅰ。结果显示,饲粮中添加：①2200IU/kg的25-OH-D3提高试验0-21天断奶仔猪的日增重和采食量,880-2200IU/kg的25-OH-D3和2200IU/kg的D3明显提高LPS应激仔猪的日增重、采食量和饲料转化率；②1320-2200IU/kg的25-OH-D3有降低作用LPS应激仔猪血清IgG浓度,显著降低IgA水平。440、880IU/kg的25-OH-D3显著降低正常仔猪第试验21天血清IgA水平；③880-2200IU/kg的25-OH-D3和2200IU/kg的D3降低LPS应激仔猪血清IL-6水平,1320-2200IU/kg的25-OH-D3降低LPS应激仔猪血清TNF-α水平；④880-2200IU/kg的25-OH-D3和D3明显提高LPS应激仔猪血清IGF-Ⅰ水平,25-OH-D3添加水平与IGF-I水平成正相关。结论饲粮添加2200IU/kg的25-OH-D3促进断奶仔猪肠道黏膜T细胞分化成熟,提高辅助T细胞介导的免疫反应、抑制细胞毒性T细胞参与的免疫应答,抑制Thl型辅助细胞参与的促炎症反应、促进Th2型辅助细胞参与的抗炎症反应,提高断奶仔猪抵抗肠道疾病的能力。饲粮添加25-OH-D3抑制免疫应激仔猪促炎症细胞因子IL-6和TNF-α的分泌,促进IGF-1分泌,缓解免疫应激对仔猪的负面影响,提高断奶仔猪的生产性能。饲粮添加2200IU/kg的25-OH-D3可提高正常条件下仔猪断奶后2-3周内生产性能、880-2200IU/kg的25-OH-D3可明显提高遭受强应激仔猪的生产性能。
