目的：基于微小RNA表达机制探讨消肿止痛膏对骨骼肌损伤后重塑和修复的影响方法：第一部分：通过观察不同载药量消肿止痛软膏对二甲苯所致的小鼠耳肿胀的消肿作用和对醋酸所致的小鼠疼痛反应的影响,评价其消肿镇痛作用,对能够继续规范化应用有着重要的临床价值、经济效益和社会意义。第二部分：基于微小RNA表达机制探讨消肿止痛膏对骨骼肌损伤后重塑和修复的作用机制。通过钝挫伤模型的方法建立大鼠腓肠肌损伤模型,观察消肿止痛膏对大鼠损伤后1d、4d、7d外表形态学与组织形态学变化,结合损伤后4d、7d、 14d、21d大鼠定量PCR检测腓肠肌微小RNA-133、MEF2、MyoD mRNA的表达水平,探讨消肿止痛膏对大鼠腓肠肌钝挫伤模型的肌肉重塑与修复的作用机制。第三部分：探讨消肿止痛膏外敷结合弹性固定治疗踝关节扭伤疼痛与肿胀的相关性；比较消肿止痛膏外敷结合弹性固定与单纯“RICE”治疗急性踝关节扭伤的临床疗效。观察70例门急诊患者以中药外敷结合弹力绷带固定与单纯使用"RICE"治疗。采用疼痛视觉模拟评分(VAS评分)、“8”字法踝关节肿胀程度测量、Takakura踝关节评分与中医病证诊断疗效标准作为评定标准。探讨患者主观感受的VAS评分和肿胀程度测量数据之间具有相关性,Takakura踝关节评分差异及疗效评价。结果：第一部分：①测定不同载药量消肿止痛软膏的消肿作用时,七厘散组、消肿止痛软膏中剂量组、消肿止痛软膏低剂量组肿胀度均小于模型组(P<0.05),各组间比较,差异无统计学意义：②测定不同载药量消肿止痛软膏的镇痛作用时,七厘散组、消肿止痛软膏中剂量组的扭体次数均小于模型组(P<0.05)。第二部分：从组织病理切片观察,模型组与治疗组损伤后1天、4天、7天等各个时间点组织形态学损伤评分均明显高于空白组(P<0.01)。治疗组在损伤后7天组织形态损伤评分明显低于模型组(P<0.05)。治疗组MEF2的表达水平显著高于空白组与模型组,这进一步证实了MEF2在外用药物中引起骨骼肌重塑及修复过程中的重要作用。MEF2在损伤后7天上升,其后表达一直维持在较高水平,至损伤后21天仍可以表达出较高水平。与模型组相比较,其表达的高峰期在14天左右,其后则基本回归到一般状态。MoyD虽然也参与了成肌细胞的分化及增殖等多个过程,其表达水平与模型组相比并无明显改变。在微小RNA表达方面,损伤后4天,空白组、模型组、治疗组无明显差异,随着时间延长,模型组与治疗组均有所上升,且治疗组上升幅度大于模型组,到达21天,模型组表达水平已经下降,趋于回归,而治疗组水平依然有上升趋势。第三部分;治疗前、后2组间VAS评分数据差异无统计学意义；治疗中2组间VAS评分数据差异有统计学意义。说明治疗前2组患者疼痛无差异,具有可比性；治疗过程中,治疗组VAS缓解情况较对照组快。2组治疗中、后肿胀程度数据均低于治疗前,说明2组患者肿胀程度均有减轻。治疗前肿胀程度无明显统计学差异,说明两组间有可比性。治疗中、后,两组间有统计学差异,治疗组较对照组肿胀程度缓解更加明显。患者VAS评分和肿胀程度之间有相关性(P<0.01)；以VAS评分作为因变量,肿胀程度数据作为自变量,两者间线性回归方程为：Y (VAS)=0.256X(肿胀程度)-4.200,可见两者之间呈正相关,随着VAS的升高,肿胀程度有升高的趋势。确定系数R2=0.407,表示因变量VAS评分变异中有40.7%可由自变量数据变化来解释。消肿止痛膏外敷结合弹性固定治疗急性踝关节扭伤,疗效明显优于单纯"RICE"治疗。结论：第一部分：①消肿止痛膏应用方便,药效持久,便于收藏携带。②消肿止痛膏高剂量组膏体过于干硬,涂抹时与皮肤的贴附性很差,影响药物有效成分吸收,影响疗效。③消肿止痛软膏对局部和全身都有良好的消肿镇痛作用。第二部分：①本实验采用的造模方法稳定、简单实用,各组动物损伤程度相当,造模后7-21天为骨骼肌损伤的修复期。②大鼠腓肠肌损伤后,在自然修复过程中,生肌调节因子与miRNA-133的表达水平呈现上升-回落的趋势,其中损伤后7-14天,为其表达的高峰期。在治疗组,MEF2与miRNA的表达水平呈现上升趋势,即使至损伤后21天,其表达仍未见明显下降趋势,可见消肿止痛软膏可以促进MEF2与miRNA的表达。③MoyD虽然也参与了成肌细胞的分化及增殖等多个过程,但其表达水平与模型组相比并无明显差异,MoyD可能与外用药物导致的骨骼肌再生修复无关。④消肿止痛软膏可以促进MEF2与miRNA的表达,MEF2与miRNA可以调节骨骼肌的再生修复,因此,消肿止痛膏可以通过基因调控,发挥对骨骼肌损伤后的再生修复作用。第三部分：①消肿止痛膏可以改善患者治疗过程中的疼痛情况,虽然在治疗后都可以达到同一水平,但在治疗过程中,治疗组优于对照组。②消肿止痛膏可以改善踝关节扭伤患者的肿胀程度、踝关节功能,其疗效明显优于单纯RICE疗法。③消肿止痛膏治疗前、后,患者疼痛与肿胀程度呈正相关性,即患者肿胀程度越重,疼痛评分越高；肿胀程度越轻,疼痛评分越低。④消肿止痛膏治疗踝关节扭伤总有效率优于单纯RICE疗法
