具有抗癌活性的单羰基姜黄素类似物的衍生化研究（Ⅲ，Ⅳ）（Ⅲ）二氢吡唑并[4,3-c]六氢吡啶的合成以及抗癌活性测定（Ⅳ）四氢吡啶并[4,3-b]吡啶酮的合成以及生物活性测定

为了发现具有抗癌活性的医药先导化合物，本文在原有工作基础上，设计并合成了通式分别为（Ⅲ）和（Ⅳ）两个系列共计57个未见文献报道的新化合物。以取代胺和丙烯酸甲酯为起始原料，依次经Michael加成，Dieckmann缩合，水解脱羧等反应得到N-取代哌啶-4-酮，再与取代苯甲醛发生Adol缩合反应得到需要的中间体化合物N-取代苄基-3,5-双苄叉基-4-哌啶酮。用该中间体化合物与苯肼在乙醇中反应合成了一系列二氢吡唑并[4,3-c]六氢吡啶衍生物(Ⅲ1-Ⅲ41)，与氰基乙酸乙酯，乙酸铵在乙醇中反应合成了一系列四氢吡啶并[4,3-b]吡啶酮衍生物(Ⅳ1-Ⅳ16)。目标化合物（Ⅲ）和（Ⅳ）的通式如下：1采用了元素分析、红外光谱（IR）、核磁共振氢谱（1H NMR）、质谱（EI-MS）等，对上述两个系列的化合物进行了结构表征，并对其物理性质、波谱性质、反应条件、合成方法进行了较为系统的分析和讨论。为了进一步了解目标化合物（Ⅲ）的空间结构，对化合物Ⅲ1进行了合成、单晶培养、X-射线衍射晶体结构测定。单晶结构证明了目标化合物（Ⅲ）为反式构型。委托上海师范大学动物细胞-分子生物学实验室，完成了化合物(Ⅲ1-Ⅲ41)对人类乳腺癌MCF-7和MDB-MB-231两种细胞系和化合物(Ⅳ1-Ⅳ16)对白血病K562,卵巢癌HO8910和肝癌SMMC-7721三种细胞系增殖影响的测定，初步的生物测试结果表明化合物Ⅲ33在这系列化合物中是活性最好的化合物，对于两种细胞系的抑制活性(对于MCF-7细胞系IC50=2.4μM，对于MDA-MB-231细胞系IC50=4.2μM)，高于商品化的抗癌药物5-氟尿嘧啶(对于MCF-7细胞系IC50=4.8μM，对于MDA-MB-231细胞系IC50=9.6μM)。化合物Ⅳ8在该系列化合物中是活性最好的化合物，它对白血病K562细胞系的抑制活性(IC50=5.79ug/mL)高于商品化抗癌药物5-氟尿嘧啶(IC50=8.56ug/mL)；委托上海师范大学动物细胞-分子生物学实验室应用流式细胞PI/AnnexinV-FITC双染色法检测了经两系列目标化合物处理细胞的凋亡情况，初步研究了两系列化合物的作用机理。委托上海医药集团股份有限公司中央研究院完成了化合物Ⅲ21,Ⅲ33在人体和大鼠肝微粒体的代谢稳定性以及化合物Ⅲ21在人肝微粒体的直接抑制作用。确定目标化合物Ⅲ21在人和大鼠肝微粒体中代谢稳定性较好（在人肝微粒体和大鼠肝微粒体中的代谢稳定性分别为44,50μL/min/mg protein），具有持久的药物作用时间和良好的生物利用度，而且化合物Ⅲ21在肝微粒体中没有直接抑制作用，不会降低底物的代谢速率而影响清除率。