FoxO1?DBD对瘦素作用的影响

FoxO1ΔDBD论文 瘦素论文 转基因动物论文 能量代谢论文
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致谢第4-9页
摘要第9-10页
1.文献综述第10-22页
    1.1 瘦素的研究进展第10-13页
        1.1.1 瘦素的发现第10页
        1.1.2 瘦素的功能第10-11页
        1.1.3 瘦素细胞信号转导机制第11页
        1.1.4 瘦素抵抗及其机制第11-13页
    1.2 叉头型转录因子1(FoxO1)的研究进展第13-15页
        1.2.1 FoxO1的发现第13页
        1.2.2 FoxO1的结构第13-14页
        1.2.3 FoxO1的功能第14-15页
    1.3 棕色脂肪组织非颤栗性产热的研究进展第15-17页
        1.3.1 非颤栗性产热的定义第15页
        1.3.2 棕色脂肪组织概述第15-16页
        1.3.3 解耦联蛋白家族(UCPs)概述第16页
        1.3.4 影响棕色脂肪组织非颤栗性产热的因素第16-17页
        1.3.5 FoxO1与UCPs第17页
    1.4 自噬的研究进展第17-19页
        1.4.1 自噬的定义第17-18页
        1.4.2 自噬的机制第18页
        1.4.3 自噬的功能第18页
        1.4.4 FoxO1与自噬第18-19页
    1.5 B族清道夫受体与过氧化物酶增殖物激活受体γ第19-22页
        1.5.1 B族清道夫受体(SRB)第19-20页
        1.5.2 过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)第20-21页
        1.5.3 过氧化物酶体增殖物激活受体γ与B族清道夫受体的关系第21-22页
2.引言第22-23页
3.材料与方法第23-48页
    3.1 实验材料第23-29页
        3.1.1 实验动物及饲粮第23页
        3.1.2 菌种与质粒第23页
        3.1.3 实验主要试剂第23-24页
        3.1.4 实验主要仪器第24-25页
        3.1.5 实验常用溶液配方第25-26页
        3.1.6 实验引物汇总第26-29页
    3.2 实验方法第29-48页
        3.2.1 FoxO1ΔDBD载体的构建及在细胞中的暂时表达第29-33页
        3.2.2 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的构建及繁育第33-34页
        3.2.3 FoxO1ΔDBD转基因小鼠基因型鉴定方法的建立第34-36页
        3.2.4 检测FoxO1ΔDBD在转基因小鼠体内的表达第36-38页
        3.2.5 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量第38-39页
        3.2.6 普通饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的葡萄糖稳态与胰岛素耐受性第39页
        3.2.7 不同条件下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCPs的转录水平第39页
        3.2.8 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCP1的翻译水平第39-40页
        3.2.9 冷刺激情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的温度变化第40页
        3.2.10 代谢笼试验第40页
        3.2.11 自噬相关基因的转录表达水平第40-41页
        3.2.12 清道夫受体CD36启动子荧光素报告基因载体构建第41-46页
        3.2.13 过氧化物酶增殖物激活受体γ表达载体构建及表达第46-48页
4.结果与分析第48-74页
    4.1 FoxO1ΔDBD载体的构建及鉴定第48-49页
    4.2 FoxO1ΔDBD在293Rb细胞内表达检测第49-50页
    4.3 PCR法鉴定FoxO1ΔDBD转基因小鼠的基因型的建立第50-51页
    4.4 FoxO1ΔDBD在转基因小鼠体内的表达第51页
    4.5 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量第51-56页
        4.5.1 普通饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量测定第51-53页
        4.5.2 高脂饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量测定第53-55页
        4.5.3 普通饮食再投喂FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量测定第55-56页
    4.6 普通饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的葡萄糖稳态与胰岛素耐受性第56-57页
    4.7 不同条件下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCPs的转录表达水平第57-59页
    4.8 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCP1的翻译表达水平第59页
    4.9 冷刺激情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的温度变化第59-60页
    4.10 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的代谢笼试验第60-65页
    4.11 不同条件下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的自噬相关基因的转录表达水平第65-66页
    4.12 清道夫受体CD36启动子荧光素报告基因载体构建第66-70页
        4.12.1 清道夫受体CD36启动子序列扩增第66-67页
        4.12.2 pMD19-T-CD36启动子载体鉴定第67-68页
        4.12.3 pGL3-CD36启动子载体构建及鉴定第68-70页
        4.12.4 pGL3-CD36启动子活性检测第70页
    4.13 过氧化物酶增殖物激活受体γ表达载体构建及表达第70-74页
        4.13.1 PPARγ序列扩增第70-71页
        4.13.2 pCMV5-myc-PPARγ表达载体构建及鉴定第71-72页
        4.13.3 pCMV5-myc-PPARγ在HepG2细胞内表达第72-73页
        4.13.4 pGL3-SRBⅠ启动子活性检测结果第73-74页
5.讨论与结论第74-77页
    5.1 讨论第74-76页
    5.2 结论第76-77页
参考文献第77-85页
ABSTRACT第85-86页
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