致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
1.文献综述 | 第10-22页 |
1.1 瘦素的研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 瘦素的发现 | 第10页 |
1.1.2 瘦素的功能 | 第10-11页 |
1.1.3 瘦素细胞信号转导机制 | 第11页 |
1.1.4 瘦素抵抗及其机制 | 第11-13页 |
1.2 叉头型转录因子1(FoxO1)的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 FoxO1的发现 | 第13页 |
1.2.2 FoxO1的结构 | 第13-14页 |
1.2.3 FoxO1的功能 | 第14-15页 |
1.3 棕色脂肪组织非颤栗性产热的研究进展 | 第15-17页 |
1.3.1 非颤栗性产热的定义 | 第15页 |
1.3.2 棕色脂肪组织概述 | 第15-16页 |
1.3.3 解耦联蛋白家族(UCPs)概述 | 第16页 |
1.3.4 影响棕色脂肪组织非颤栗性产热的因素 | 第16-17页 |
1.3.5 FoxO1与UCPs | 第17页 |
1.4 自噬的研究进展 | 第17-19页 |
1.4.1 自噬的定义 | 第17-18页 |
1.4.2 自噬的机制 | 第18页 |
1.4.3 自噬的功能 | 第18页 |
1.4.4 FoxO1与自噬 | 第18-19页 |
1.5 B族清道夫受体与过氧化物酶增殖物激活受体γ | 第19-22页 |
1.5.1 B族清道夫受体(SRB) | 第19-20页 |
1.5.2 过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ) | 第20-21页 |
1.5.3 过氧化物酶体增殖物激活受体γ与B族清道夫受体的关系 | 第21-22页 |
2.引言 | 第22-23页 |
3.材料与方法 | 第23-48页 |
3.1 实验材料 | 第23-29页 |
3.1.1 实验动物及饲粮 | 第23页 |
3.1.2 菌种与质粒 | 第23页 |
3.1.3 实验主要试剂 | 第23-24页 |
3.1.4 实验主要仪器 | 第24-25页 |
3.1.5 实验常用溶液配方 | 第25-26页 |
3.1.6 实验引物汇总 | 第26-29页 |
3.2 实验方法 | 第29-48页 |
3.2.1 FoxO1ΔDBD载体的构建及在细胞中的暂时表达 | 第29-33页 |
3.2.2 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的构建及繁育 | 第33-34页 |
3.2.3 FoxO1ΔDBD转基因小鼠基因型鉴定方法的建立 | 第34-36页 |
3.2.4 检测FoxO1ΔDBD在转基因小鼠体内的表达 | 第36-38页 |
3.2.5 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量 | 第38-39页 |
3.2.6 普通饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的葡萄糖稳态与胰岛素耐受性 | 第39页 |
3.2.7 不同条件下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCPs的转录水平 | 第39页 |
3.2.8 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCP1的翻译水平 | 第39-40页 |
3.2.9 冷刺激情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的温度变化 | 第40页 |
3.2.10 代谢笼试验 | 第40页 |
3.2.11 自噬相关基因的转录表达水平 | 第40-41页 |
3.2.12 清道夫受体CD36启动子荧光素报告基因载体构建 | 第41-46页 |
3.2.13 过氧化物酶增殖物激活受体γ表达载体构建及表达 | 第46-48页 |
4.结果与分析 | 第48-74页 |
4.1 FoxO1ΔDBD载体的构建及鉴定 | 第48-49页 |
4.2 FoxO1ΔDBD在293Rb细胞内表达检测 | 第49-50页 |
4.3 PCR法鉴定FoxO1ΔDBD转基因小鼠的基因型的建立 | 第50-51页 |
4.4 FoxO1ΔDBD在转基因小鼠体内的表达 | 第51页 |
4.5 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量 | 第51-56页 |
4.5.1 普通饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量测定 | 第51-53页 |
4.5.2 高脂饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量测定 | 第53-55页 |
4.5.3 普通饮食再投喂FoxO1ΔDBD转基因小鼠的体重和采食量测定 | 第55-56页 |
4.6 普通饮食情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的葡萄糖稳态与胰岛素耐受性 | 第56-57页 |
4.7 不同条件下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCPs的转录表达水平 | 第57-59页 |
4.8 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的UCP1的翻译表达水平 | 第59页 |
4.9 冷刺激情况下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的温度变化 | 第59-60页 |
4.10 FoxO1ΔDBD转基因小鼠的代谢笼试验 | 第60-65页 |
4.11 不同条件下FoxO1ΔDBD转基因小鼠的自噬相关基因的转录表达水平 | 第65-66页 |
4.12 清道夫受体CD36启动子荧光素报告基因载体构建 | 第66-70页 |
4.12.1 清道夫受体CD36启动子序列扩增 | 第66-67页 |
4.12.2 pMD19-T-CD36启动子载体鉴定 | 第67-68页 |
4.12.3 pGL3-CD36启动子载体构建及鉴定 | 第68-70页 |
4.12.4 pGL3-CD36启动子活性检测 | 第70页 |
4.13 过氧化物酶增殖物激活受体γ表达载体构建及表达 | 第70-74页 |
4.13.1 PPARγ序列扩增 | 第70-71页 |
4.13.2 pCMV5-myc-PPARγ表达载体构建及鉴定 | 第71-72页 |
4.13.3 pCMV5-myc-PPARγ在HepG2细胞内表达 | 第72-73页 |
4.13.4 pGL3-SRBⅠ启动子活性检测结果 | 第73-74页 |
5.讨论与结论 | 第74-77页 |
5.1 讨论 | 第74-76页 |
5.2 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
ABSTRACT | 第85-86页 |