酵母细胞内腔调控的无机纳米材料的生物合成及其应用
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物理与化学合成是运用最广泛,也是传统的合成化学物质的方法,它们在纳米颗粒合成领域中做出了很重要的贡献,但是随着人们对环境的要求越来越高,人们逐渐寻求一种环境友好、低成本、温和及无毒性的合成方法来合成纳米颗粒,生物合成方法满足这样一种绿色合成方法的要求,它利用生物体内部基质及特有的生命活性来指导纳米颗粒的合成,可以通过改变培养条件,如pH、温度、反应物浓度、微生物用量等,来得到形态各异、大小不同的纳米颗粒。到现在为止,科学家们已经利用类似植物、细菌、真菌等一系列宏观及微观的生命体成功的制备了纳米级的金属单质、金属氧化物、金属属硫化物、金属硒化物等。采用生物体合成的纳米物质还具有良好的生物相容性、尺寸可控性,已经在医学、电子器件、生物工程学等方面有了很大的应用。目前为止,生物体合成过程中,大部分是用生物体外部的官能团作为模板,纳米物质的种类也是主要局限于金属单质、金属氧化物及金属硫化物。在本篇文章中,主要将生物体-酵母细胞作为研究的主体,在其内部合成得到了碳酸钡及羟基磷灰石纳米颗粒。在本篇文章的主题选择上,我们把酵母细胞作为一个发生化学反应的容器,以麦芽糖作为细胞的能量来源,然后加入一定浓度的氢氧化钡溶液,在室温条件下搅拌反应,最终得到了含碳酸钡的酵母细胞。运用磷酸盐与钙盐作为反应物,在室温条件下得到了含羟基磷灰石(HA)的酵母细胞,并用激光共聚焦显微镜,傅里叶红外变换,高倍透射电镜,X射线光谱等测试方法对所得到的无机物进行了表征,由于含HA的酵母细胞对环境没有污染作用,我们将样品在作为药物载体及样品对重金属离子的吸附方面做了一些测试与研究,用原子吸收光谱(AAS)及紫外可见分光光度仪(UV-VIS)对所得含HA的酵母细胞在药物负载运输和废水处理中的潜在应用的过程及结果进行了表征。实验测试分析所得到的结果为:通过生物合成方法在细胞内部制备得到了碳酸钡纳米颗粒,它们的颗粒大小大概为5nm。纳米级的碳酸钡进入酵母细胞内部之后,细胞大多数还保持着活性,与纯酵母细胞繁殖速率基本上一致;在酵母细胞内部同时也得到了羟基磷灰石颗粒,它们的颗粒大小大概为5nm。纳米级的羟基磷灰石进入酵母细胞内部之后,不会使细胞死亡,与纯酵母细胞繁殖速率相比延迟。含有HA的酵母细胞在作为药物载体应用方面的结果显示:对抗癌药物盐酸阿霉素的负载量上,含有羟基磷灰石的细胞要多于纯酵母,而且整个体系还具有随着pH值的增加而降低的pH敏感性;含HA的细胞作为生物吸附剂在对重金属铅、镉等吸附方面的应用结果显示:含HA的细胞对金属离子的吸附效果好于纯酵母细胞,表明细胞内部的羟基磷灰石颗粒提高了酵母细胞在重金属吸附方面的性能。本论文以酵母细胞作为微反应器,采用常温震荡或者搅拌的方法首次得到了细胞内的纳米级碳酸钡及羟基磷灰石颗粒,对利用生物体合成其他无机物提供了新的实验及机理研究依据。另外合成的羟基磷灰石可以被用作重金属吸附剂及药物载体,也为其它类似的应用提供一个参考及借鉴的作用。
摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 纳米材料的传统合成方法 | 第11-12页 |
1.1.1 纳米材料的物理合成方法 | 第12页 |
1.1.2 纳米材料的化学合成方法 | 第12页 |
1.2 纳米材料的生物合成方法 | 第12-20页 |
1.2.1 生物合成方法简介 | 第12-13页 |
1.2.2 利用微生物体合成纳米颗粒 | 第13-16页 |
1.2.3 真菌中酵母细胞的应用 | 第16-20页 |
1.3 本论文的研究背景,研究内容和特点 | 第20-22页 |
1.3.1 研究背景 | 第20-21页 |
1.3.2 研究内容 | 第21页 |
1.3.3 本论文特点 | 第21-22页 |
第二章 酵母内碳酸钡纳米颗粒的制备及表征 | 第22-30页 |
2.1 前言 | 第22-23页 |
2.2 实验部分 | 第23-25页 |
2.2.1 实验药品 | 第23页 |
2.2.2 实验仪器 | 第23页 |
2.2.3 实验方法 | 第23-25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-29页 |
2.3.1 扫描电镜(SEM)的检测 | 第25页 |
2.3.2 X 射线衍射(XRD)检测 | 第25-26页 |
2.3.3 傅里叶红外转换(FT-IR) | 第26-27页 |
2.3.4 热重-差热及高倍透射电镜的检测 | 第27-28页 |
2.3.5 碳酸钡细胞的活性测试 | 第28-29页 |
2.4 小结 | 第29-30页 |
第三章 酵母内羟基磷灰石纳米颗粒的制备及表征 | 第30-40页 |
3.1 前言 | 第30页 |
3.2 实验部分 | 第30-33页 |
3.2.1 实验药品 | 第30-31页 |
3.2.2 实验仪器 | 第31页 |
3.2.3 实验方法 | 第31-33页 |
3.3 结果与讨论 | 第33-39页 |
3.3.1 扫描电子显微镜的检测 | 第33-34页 |
3.3.2 X 射线粉末衍射仪的检测 | 第34-35页 |
3.3.3 傅里叶红外转换图谱的检测 | 第35-36页 |
3.3.4 热重差热的表征 | 第36页 |
3.3.5 高倍透射电镜及能谱的检测 | 第36-37页 |
3.3.6 激光共聚焦显微镜的探测 | 第37-38页 |
3.3.7 细胞的活性测试 | 第38-39页 |
3.4 小结 | 第39-40页 |
第四章 含羟基磷灰石的酵母细胞在药物运输方面的应用研究 | 第40-48页 |
4.1 前言 | 第40-41页 |
4.2 实验部分 | 第41-43页 |
4.2.1 实验药品 | 第41页 |
4.2.2 实验仪器 | 第41页 |
4.2.3 实验方法 | 第41-43页 |
4.3 结果与讨论 | 第43-46页 |
4.3.1 激光共聚焦显微镜(CLSM)对 DOX 的检测 | 第43-44页 |
4.3.2 负载 DOX 的羟基磷灰石细胞在不同 pH 值的 PBS 缓冲液下的释放 | 第44-45页 |
4.3.3 含叶酸的 HAcell 的制备 | 第45-46页 |
4.3.4 细胞毒性试验 | 第46页 |
4.4 小结 | 第46-48页 |
第五章 含羟基磷灰石的酵母细胞在重金属吸附方面的应用研究 | 第48-58页 |
5.1 前言 | 第48-49页 |
5.2 实验部分 | 第49-52页 |
5.2.1 实验药品 | 第49页 |
5.2.2 实验仪器 | 第49页 |
5.2.3 实验方法 | 第49-52页 |
5.3 结果与讨论 | 第52-57页 |
5.3.1 重金属溶液的初始浓度对其移除效率的影响 | 第52-53页 |
5.3.2 吸附时间不同时对重金属移除效率的影响 | 第53页 |
5.3.3 重金属溶液 pH 值对其移除效率的影响 | 第53-54页 |
5.3.4 吸附剂的用量对重金属移除效率的影响 | 第54-55页 |
5.3.5 两种重金属共存时对其移除效率的影响 | 第55页 |
5.3.6 不同温度下吸附剂对重金属移除效率的影响 | 第55-56页 |
5.3.7 吸附后重金属离子的固体样品的表征 | 第56-57页 |
5.4 小结 | 第57-58页 |
第六章 结论与展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第67-68页 |
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