抗猪流行性腹泻纳米纤维素单链抗体的构建、高效表达及制备

猪流行性腹泻论文 PEDV论文 CBD-scFv论文
论文详情
致谢第4-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-15页
    1.1 猪流行性腹泻简介第8-11页
        1.1.1 猪流行性腹泻病毒第8-9页
        1.1.2 猪流行性腹泻第9页
        1.1.3 猪流行性腹泻病毒疫苗研究第9-11页
    1.2 单链抗体概述第11-13页
        1.2.1 单链抗体及其研究进展第11-12页
        1.2.2 单链抗体应用第12-13页
    1.3 纳米纤维素概述第13-15页
        1.3.1 纳米纤维素及其应用第13页
        1.3.2 纤维素酶结合结构域第13-15页
2 引言第15-16页
3 材料与方法第16-34页
    3.1 材料、试剂与耗材第16-18页
        3.1.1 质粒、菌株、细胞第16页
        3.1.2 主要试剂及培养基第16-17页
        3.1.3 实验仪器及设备第17-18页
    3.2 实验方法第18-34页
        3.2.1 重组质粒pET19b-CBD-scFv构建第18-23页
        3.2.2 重组质粒pET19b-CBD-scFv的表达与鉴定第23-24页
        3.2.3 CBD-scFv蛋白表达产物的检测第24-26页
        3.2.4 重组蛋白CBD-scFv的提取与复性第26-27页
        3.2.5 纳米纤维素的制备第27-28页
        3.2.6 纳米纤维素检测第28页
        3.2.7 纳米纤维素与复性CBD-scFv结合实验第28-29页
        3.2.8 PEDV培养及鉴定第29-33页
        3.2.9 PEDV与复性蛋白CBD-scFv中和活性鉴定第33-34页
4 结果与分析第34-46页
    4.1 重组质粒PET19B-CBD-SCFV的构建第34-35页
        4.1.1 目的基因CBD-scFv与质粒pET19b双酶切结果第34-35页
        4.1.2 重组质粒pET19b-CBD-scFv酶切鉴定第35页
    4.2 重组蛋白CBD-SCFV的表达鉴定及条件优化第35-38页
        4.2.1 重组蛋白CBD-scFv表达可溶与否鉴定第35-36页
        4.2.2 诱导温度与蛋白CBD-scFv关系第36-37页
        4.2.3 IPTG诱导剂量与蛋白CBD-scFv表达关系第37-38页
        4.2.4 IPTG诱导时间与蛋白CBD-scFv表达关关系第38页
    4.3 WESTERNBLOT鉴定重组蛋白CBD-SCFV第38-39页
    4.4 重组蛋白CBD-SCFV提取及复性第39页
    4.5 纳米纤维素制备结果分析第39-40页
    4.6 CBD-SCFV与纳米纤维素结合条件优化第40-43页
        4.6.1 CBD-scFv与纳米纤维素结合温度优化鉴定结果第40-41页
        4.6.2 CBD-scFv与纳米纤维素结合时间优化鉴定结果第41-42页
        4.6.3 CBD-scFv与纳米纤维素浓度优化结合鉴定结果第42-43页
    4.7 PEDV培养及鉴定第43-45页
        4.7.1 PEDV培养第43-44页
        4.7.2 PEDV鉴定第44页
        4.7.3 PEDV的TCID50测定第44-45页
    4.8 复性后CBD-SCFV与PEDV中和作用检测第45-46页
5 结论与讨论第46-49页
    5.1 讨论第46-47页
    5.2 结论第47-49页
参考文献第49-55页
Abstract第55-56页
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