抗猪流行性腹泻纳米纤维素单链抗体的构建、高效表达及制备
猪流行性腹泻论文 PEDV论文 CBD-scFv论文
论文详情
致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-15页 |
1.1 猪流行性腹泻简介 | 第8-11页 |
1.1.1 猪流行性腹泻病毒 | 第8-9页 |
1.1.2 猪流行性腹泻 | 第9页 |
1.1.3 猪流行性腹泻病毒疫苗研究 | 第9-11页 |
1.2 单链抗体概述 | 第11-13页 |
1.2.1 单链抗体及其研究进展 | 第11-12页 |
1.2.2 单链抗体应用 | 第12-13页 |
1.3 纳米纤维素概述 | 第13-15页 |
1.3.1 纳米纤维素及其应用 | 第13页 |
1.3.2 纤维素酶结合结构域 | 第13-15页 |
2 引言 | 第15-16页 |
3 材料与方法 | 第16-34页 |
3.1 材料、试剂与耗材 | 第16-18页 |
3.1.1 质粒、菌株、细胞 | 第16页 |
3.1.2 主要试剂及培养基 | 第16-17页 |
3.1.3 实验仪器及设备 | 第17-18页 |
3.2 实验方法 | 第18-34页 |
3.2.1 重组质粒pET19b-CBD-scFv构建 | 第18-23页 |
3.2.2 重组质粒pET19b-CBD-scFv的表达与鉴定 | 第23-24页 |
3.2.3 CBD-scFv蛋白表达产物的检测 | 第24-26页 |
3.2.4 重组蛋白CBD-scFv的提取与复性 | 第26-27页 |
3.2.5 纳米纤维素的制备 | 第27-28页 |
3.2.6 纳米纤维素检测 | 第28页 |
3.2.7 纳米纤维素与复性CBD-scFv结合实验 | 第28-29页 |
3.2.8 PEDV培养及鉴定 | 第29-33页 |
3.2.9 PEDV与复性蛋白CBD-scFv中和活性鉴定 | 第33-34页 |
4 结果与分析 | 第34-46页 |
4.1 重组质粒PET19B-CBD-SCFV的构建 | 第34-35页 |
4.1.1 目的基因CBD-scFv与质粒pET19b双酶切结果 | 第34-35页 |
4.1.2 重组质粒pET19b-CBD-scFv酶切鉴定 | 第35页 |
4.2 重组蛋白CBD-SCFV的表达鉴定及条件优化 | 第35-38页 |
4.2.1 重组蛋白CBD-scFv表达可溶与否鉴定 | 第35-36页 |
4.2.2 诱导温度与蛋白CBD-scFv关系 | 第36-37页 |
4.2.3 IPTG诱导剂量与蛋白CBD-scFv表达关系 | 第37-38页 |
4.2.4 IPTG诱导时间与蛋白CBD-scFv表达关关系 | 第38页 |
4.3 WESTERNBLOT鉴定重组蛋白CBD-SCFV | 第38-39页 |
4.4 重组蛋白CBD-SCFV提取及复性 | 第39页 |
4.5 纳米纤维素制备结果分析 | 第39-40页 |
4.6 CBD-SCFV与纳米纤维素结合条件优化 | 第40-43页 |
4.6.1 CBD-scFv与纳米纤维素结合温度优化鉴定结果 | 第40-41页 |
4.6.2 CBD-scFv与纳米纤维素结合时间优化鉴定结果 | 第41-42页 |
4.6.3 CBD-scFv与纳米纤维素浓度优化结合鉴定结果 | 第42-43页 |
4.7 PEDV培养及鉴定 | 第43-45页 |
4.7.1 PEDV培养 | 第43-44页 |
4.7.2 PEDV鉴定 | 第44页 |
4.7.3 PEDV的TCID50测定 | 第44-45页 |
4.8 复性后CBD-SCFV与PEDV中和作用检测 | 第45-46页 |
5 结论与讨论 | 第46-49页 |
5.1 讨论 | 第46-47页 |
5.2 结论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
Abstract | 第55-56页 |
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